人源性成分DNA探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)
商品属性
产品名称 | 人源性成分DNA探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) | 英文名称 | Human-derived Component DNA Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
规格 | 50T | 货号 | PR4806 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专为人源性成分DNA检测设计，适用于科研领域的定性或定量分析。试剂盒采用优化引物及探针，确保高灵敏度和特异性，避免与其他生物样本的DNA发生交叉反应。
产品特点
即开即用：用户仅需提供DNA模板，无需额外配制主反应液。
高灵敏度：检测下限可达50拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。
特异性强：引物针对人源性DNA高度保守区设计，避免非特异性扩增。
防污染设计：提供无传染性阳性对照片段，便于区分假阴性结果。
灵活应用：支持绝对定量（需标准曲线）或定性检测（Ct值判读）。
兼容性广：与多数核酸提取试剂兼容，推荐配套使用柱式提取试剂或免提取释放剂。
试剂盒组分
探针法qPCR缓冲液（500 μL）
qPCR酶混合液（100 μL）
荧光PCR模板稀释液（1 mL）
人源性成分引物-探针混合液（150 μL）
阳性对照（50 μL，1×10^7拷贝/μL）
使用说明书（1份）
操作步骤
DNA提取
使用自选方法或配套核酸提取试剂纯化样本DNA，建议设置阴性对照（水）和阳性对照（试剂盒提供）。
标准曲线制备（定量检测需选）
标记6管，依次加入45 μL稀释液。
梯度稀释阳性对照（10^7拷贝/μL起始），依次获得10^6至10^1拷贝/μL的标准品。
所有操作需在独立区域进行，避免污染。
qPCR反应体系（20 μL体系）
配制反应液：按样本数（N）准备N+8管（含阴性对照及标准曲线管）。
每管加入18 μL主反应液，2 μL模板（样本/对照）。
加样顺序：阴性对照→待测样本→阳性对照。
扩增程序
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环（40轮）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（荧光采集）
（具体程序请参考仪器型号调整）
数据分析
定量检测：以标准品Ct值绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性检测：
阳性：Ct ≤ 36，扩增曲线呈S型。
阴性：Ct ≥ 40或无Ct值。
灰区（36 < Ct < 40）：需复测确认。
注意事项
分区操作：样本制备、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。
质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；阳性对照单独存放。
安全规范：实验后使用10%次氯酸或75%乙醇清洁台面及移液器。
运输与储存
运输：低温干冰运输。
储存：-20℃保存，避免反复冻融。
适用范围声明
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断或其他用途。
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关键字： 人源性成分DNA;探针法荧光定量;PCR试剂盒;
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