产品介绍:

这是一种用于检测布鲁氏菌(Brucella spp.)的高灵敏度分子诊断试剂,广泛应用于疾控中心、医院检验科及畜牧兽医领域。
产品名称 | 布氏杆菌(BS)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) | 货号 | AP3698 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
1. 核心用途与背景 ��
针对疾病:布鲁氏菌病(Brucellosis),俗称“布病”,是一种人畜共患的传染性疾病。
检测对象:试剂盒通常针对布鲁氏菌基因组中的保守序列(如BCSP31基因、IS711插入序列或16S rRNA基因)进行扩增。
适用样本:适用于全血(抗凝血)、血清、组织液、牛奶、流产胎儿组织等临床样本。
应用场景:用于布氏杆菌感染的早期辅助诊断、流行病学调查及动物检疫。
2. 检测原理与技术 ��

技术方法:实时荧光PCR法(TaqMan探针法)。
原理:设计一对布鲁氏菌特异性引物和一条特异性探针。在PCR扩增过程中,探针被Taq酶水解,释放荧光基团,通过检测荧光信号的累积来判断样本中是否存在布鲁氏菌核酸。
内标质控:部分高端试剂盒包含内源性内标(IC),用于监测试剂盒的有效性及样本中是否存在PCR抑制物。
3. 主要性能参数 ��

性能指标 参数详情 备注
检测限 10² - 10³ 拷贝/反应 灵敏度极高,可检测出低浓度感染
特异性 100% 不与结核分枝杆菌、大肠杆菌等非目标菌种发生交叉反应
检测时间 约 1.5 - 2 小时 含核酸提取及扩增过程
包装规格 25T / 50T / 48T T代表测试次数
储存条件 -20℃ 避光保存,反复冻融不超过5次
有效期 12个月 具体以产品说明书为准
4. 推荐反应程序 (PCR仪设置) ⚙️

以下是通用的两步法扩增程序参考(具体请以所购试剂盒说明书为准):
UNG处理(防污染):37℃,2分钟(min)。
预变性:95℃,3-5分钟(min)。
PCR扩增(40-45个循环):
变性:95℃,5-15秒(s)。
退火/延伸:55℃ - 58℃,30-40秒(s)(在此阶段采集荧光信号)。
5. 结果判读标准 ��

阳性(+):FAM荧光通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值 ≤ 35(部分厂家标准为38)。
阴性(-):FAM通道无Ct值,或Ct值 > 38,且无指数增长期。
无效实验:
阳性对照无扩增(Ct值 > 35 或无曲线)。
阴性对照出现扩增曲线。
注:若对照不符合要求,本次实验作废。
温馨提示
生物安全:布鲁氏菌属于生物安全三级病原(BSL-3),在处理阳性样本时,务必在生物安全柜中操作,做好个人防护(戴手套、口罩)。
假阳性风险:对于已经接种过布鲁氏菌疫苗或使用抗生素治疗后的样本,由于细菌DNA可能仍存在,PCR检测可能会呈阳性,需结合临床症状和血清学检测(如SAT、ELISA)综合判断。
核酸提取:建议使用试剂盒配套的核酸提取试剂,或使用磁珠法/离心柱法提取试剂,以保证提取效率。
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通用操作流程与注意事项:

1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA,需设置阳性、阴性对照。
关键点:避免交叉污染,阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR:
预变性→循环扩增→延伸
qPCR:
预变性→循环扩增(荧光采集)
4. 结果判读
常规PCR:电泳观察条带大小(如阳性对照需出现预期条带)。
qPCR:Ct值≤35为阳性,阴性对照无信号。
关键字: 布氏杆菌;BS ;核酸检测试剂盒;荧光PCR法;
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