金鱼造血器官坏死病毒（GFHNV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

产品介绍：

金鱼造血器官坏死病毒（GFHNV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种用于体外定性检测金鱼造血器官坏死病毒（Goldfish Hematopoietic Necrosis Virus, GFHNV）的诊断工具。该病毒属于虹彩病毒科，是导致金鱼等鲤科鱼类出现严重出血、烂鳃、肝脾肾肿大及高死亡率的主要病原之一。

检测原理

该试剂盒通常基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR（qPCR）技术，部分先进产品采用双重TaqMan探针法，以提高检测的准确性。其检测流程如下：

核酸提取： 从疑似感染鱼类的组织样本（如脾脏、肾脏、鳃等）中提取总DNA。

荧光PCR扩增： 这是核心环节。反应体系中包含针对GFHNV基因组保守区域（如特异性基因片段）设计的特异性引物和荧光标记的TaqMan探针。

双重探针优势： 一些试剂盒设计了两对特异性引物和两种不同荧光标记的探针（如FAM和VIC通道），同时检测病毒的两个不同基因位点。这不仅提高了检测的特异性，还能有效避免因病毒基因突变导致的漏检，相较于单一探针法具有更高的准确性和可靠性。

信号检测： 在PCR扩增过程中，如果样本中含有GFHNV DNA，探针会被特异性切断，释放出荧光信号。仪器实时监测荧光信号的增长情况，从而判断样本中是否含有病毒核酸。

主要用途

该试剂盒主要用于以下几个方面：

临床疫病诊断： 辅助诊断由GFHNV引起的金鱼出血病、造血器官坏死等疾病，帮助渔医快速锁定病因。

水产养殖监测： 用于养殖场的日常监测，及时发现带毒鱼群，防止疫情暴发。

种苗检疫： 在苗种繁育阶段进行检测，确保种苗健康，建立无特定病原（SPF）群体。

科研与标准符合： 该检测方法符合国家标准《GB/T 36194-2018 金鱼造血器官坏死病毒检测方法》的要求，也广泛应用于相关病毒学研究。

方法优势

相较于传统的病毒分离或普通PCR检测，荧光PCR法具有显著优势：

高特异性： 特别是采用双重探针法的试剂盒，能精准识别GFHNV，避免与同类病毒（如传染性造血器官坏死病毒IHNV）发生交叉反应。

高灵敏度： 能够检测出极低拷贝数的病毒DNA，有助于在感染早期或潜伏期做出准确判断。

快速高效： 检测过程通常在1-2小时内完成，适合对大量样本进行高通量筛查。

高准确性： 闭管操作避免了扩增后的交叉污染，双重探针设计进一步降低了假阳性或假阴性的风险。

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通用操作流程与注意事项：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。