产品介绍：
该试剂盒是一种能同时检测卵形疟原虫和三日疟原虫的高特异性分子诊断工具，通过双重TaqMan探针技术实现对两种疟原虫的精准鉴别检测，其灵敏度可达10³-10⁴ copies/mL，特异性≥99%，适用于科研实验中的病原体筛查和辅助分析，但仅限科研使用，不能用于临床诊断。
产品名称 | 卵形疟原虫 / 三日疟原虫核酸检测试剂盒(双重荧光 PCR 法 ) | 货号 | AP3267 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
一、核心作用与检测原理
该试剂盒主要用于同时检测血液等临床样本中卵形疟原虫(Plasmodium ovale)和三日疟原虫(Plasmodium malariae)，其核心原理基于两种疟原虫的特异性基因片段：
靶标选择：针对卵形疟原虫和三日疟原虫的特异性基因区域设计引物和探针。具体的靶标基因在所给资料中未明确指出。
检测方法：采用双重TaqMan探针荧光PCR技术，通过不同荧光通道(FAM/HEX)区分两种疟原虫
防污染系统：部分试剂盒含有UDG/dUTP防污染系统，在室温条件下即可发挥作用，有效防止污染7
二、产品性能与规格参数
性能指标 参数说明
检测方法 双重TaqMan荧光定量PCR
规格 48-50T/盒
保存条件 -20℃保存，避免反复冻融
有效期 6个月至1年（不同品牌有差异）
适用仪器 ABI系列、Bio-Rad系列、Roche系列、杭州博日系列等主流荧光定量PCR仪
检测范围 2×10²-1×10⁸ copies/mL（不同品牌有差异）
最低检测限 1×10²-1×10³ copies/mL（不同品牌有差异）
特异性 95%-99%（即真阴性率）
灵敏度 75%-98%（即真阳性率）
特异性 95%-99%（即真阴性率）
三、操作流程与质量控制
核心操作步骤
样本采集：用一次性无菌注射器抽取疑似人或动物血3-5ml，置于枸橼酸或EDTA2Na抗凝管中
DNA提取：可采用试剂盒配备的DNA抽提液或商业化产品进行核酸提取
试剂配制：将荧光PCR反应液(qPCR MIX)与核酸模板按比例混合(通常为14-15μL反应液+5-6μL模板)
扩增反应：运行双重荧光PCR程序（不同试剂盒的程序可能存在差异。例如，一个试剂盒推荐的程序为：95℃预变性5分钟；然后进行40个循环的扩增，每个循环包含95℃ 15秒和60℃ 30-40秒。而另一个试剂盒则推荐：95℃预变性5分钟；然后进行30个循环的扩增，每个循环包含95℃ 15秒、57℃ 15秒、72℃ 40秒；最后在72℃延伸10分钟。具体反应条件应以所使用试剂盒的说明书为准。）
质量控制要点
阴阳性对照：必须设置阴性对照（应无扩增或Ct值≥40）和阳性对照（应有典型扩增曲线且Ct值≤35）
严格分区操作：分为试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区，避免交叉污染
防污染措施：使用带滤芯吸头，实验后用10%次氯酸或75%酒精处理工作台
标准曲线：部分试剂盒需制备标准曲线进行定量分析
四、应用场景与局限性
主要应用场景
科研研究：疟原虫分子生物学特性研究
疾病监测：在疟疾流行区进行监测
疫情调查：在疑似疫情暴发时进行病原体确认
出入境检疫：对出入境人员进行疟原虫筛查
检测方法局限性
仅限科研：根据产品说明，该试剂盒仅可用于科研实验，不能用于临床医疗
无法区分活菌：PCR检测不能区分活菌与死菌，阳性结果需结合临床症状综合判断
样本质量依赖：样本采集、运输和保存不当会导致DNA降解，影响检测结果
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注意事项
实验操作规范
严格分区操作：试剂配制区、样本处理区、扩增区需物理隔离，防止气溶胶污染。
每次实验需设置阴性对照（无模板DNA）、阳性对照（已知PAT基因样本）及空白对照（仅缓冲液）。
加样时避免过量或不足，推荐低容量反应管以提高热传导率。
污染防控
定期监测实验室空气、加样枪及仪器表面污染，可通过擦拭采样后扩增验证。
扩增产物需在专用区域处理，避免开盖时形成气溶胶污染。
关键字： 卵形疟原虫 / 三日疟原虫 ;核酸检测试剂盒;双重荧光 PCR 法;
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