产品介绍：
该试剂盒采用双重TaqMan探针技术，可同时检测猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV），具有高特异性（95%-99%）、高灵敏度（75%-98%）和快速检测（1.5-2小时）的特点，适用于猪场腹泻疫情快速诊断、鉴别诊断及流行病学调查，但需注意其结果需结合临床症状综合判断且对样本质量要求高。
产品名称 | 猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒(TGEV/PEDV)核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法) | 货号 | AP3988 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
一、核心作用与检测原理
该试剂盒主要用于同时检测猪粪便、肠道组织等样本中的TGEV和PEDV，其核心原理基于：
双重靶标设计：针对TGEV的N基因或S基因（FAM通道）和PEDV的M基因或ORF3基因（VIC/HEX通道）设计特异性引物和探针
荧光通道分配：TGEV检测通道（如FAM通道）和PEDV检测通道（如VIC/HEX通道）实现同步检测，部分试剂盒含猪源性内参基因（如β-actin，Cy5通道）监控样本质量
技术优势：单管双重检测避免交叉污染，特异性高，可有效区分TGEV和PEDV引起的腹泻疫情28
二、产品性能与规格参数
性能指标 参数说明
检测方法 双重TaqMan荧光定量RT-PCR
规格 50T/盒（常见规格）
保存条件 -20℃以下，避光保存，避免反复冻融
有效期 12个月
适用仪器 ABI系列、Bio-Rad系列、Roche LightCycler 480等多通道实时荧光定量PCR仪
检测范围 2×10³～1×10⁸ copies/mL
最低检测限 1×10³ copies/mL
特异性 95%-99%（真阴性率）
灵敏度 75%-98%（真阳性率）
特异性 95%-99%（真阴性率）
三、操作流程与结果判读
核心操作步骤
样本采集：猪粪便（1g左右）或肠道组织（1g左右），置于病毒保存液中，2-8℃冰袋保存
核酸提取：采用磁珠法或柱提法提取RNA，避免反复冻融
试剂配制：将反应液与核酸模板按特定比例混合（不同试剂盒体系存在差异，例如20μL或25μL体系），并设置阴阳性对照
扩增反应：典型的扩增程序包括：50℃反转录10-30分钟，95℃预变性3-5分钟，然后进行40-45个循环的扩增（95℃变性15-30秒，55-60℃退火延伸30-45秒）。具体操作应以所使用试剂盒的说明书为准。13
结果判读标准
阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈明显指数增长
可疑：35＜Ct值≤38（或根据试剂盒说明书设定的其他阈值），需复测确认
阴性：Ct值＞38（或根据试剂盒说明书设定的其他阈值），无明显扩增曲线
实验有效性：阴性对照Ct值＞38或无Ct值，阳性对照Ct值≤30-32且呈典型"S"型曲线
四、应用场景与核心优势
主要应用场景
临床诊断：对猪群水样腹泻、呕吐等症状进行快速鉴别诊断，区分TGEV和PEDV感染
流行病学监测：监测猪场腹泻病原的流行情况，评估疫苗免疫效果
引种监测：对引进的后备猪进行检测，防止引入新的病毒株
混合感染筛查：与猪德尔塔冠状病毒（PdCoV）等其他腹泻病原进行同步检测
核心优势
双重检测机制：单管反应同时检测两种病原，节省时间与样本，避免交叉污染
高灵敏度：可检测低至1×10³ copies/mL的病毒载量，显著优于传统培养法
特异性强：与猪其他冠状病毒（如PdCoV）无交叉反应，可准确区分TGEV和PEDV
快速高效：1.5-2小时出结果，较传统病毒培养法（24-48小时）效率大幅提升
无法区分活病毒：PCR检测不能区分活病毒与死病毒，阳性结果需结合临床症状综合判断
样本质量依赖：样本采集、运输和保存不当会导致RNA降解，影响检测结果
基因变异影响：病毒基因突变或重组可能导致引物结合位点改变，产生假阴性结果
窗口期限制：感染初期（前3-5天）病毒载量最高，采样时间影响检出率
仅限科研用途：根据产品说明，该试剂盒仅可用于科研实验，不能直接用于临床诊断
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应用场景与产品选择建议
科研领域：
常规PCR试剂盒。
临床诊断：
探针法qPCR试剂盒（如牛白血病病毒，灵敏度100拷贝/反应）。
现场检测：
恒温扩增试剂盒（如LAMP法，90分钟出结果）
关键字： 猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒;TGEV/PEDV;双重荧光 PCR 法;核酸检测试剂盒;
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