猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒(TGEV/PEDV)检测试剂盒(双重荧光PCR法)
简介:
检测目标:一次性检测两种导致猪(尤其是新生仔猪)急性、高度接触性肠道传染病的关键病毒:
TGEV:猪传染性胃肠炎病毒
PEDV:猪流行性腹泻病毒
技术原理:双重实时荧光定量RT-PCR。它通过在一个反应体系中加入两套针对不同病毒的引物和探针,实现对TGEV和PEDV的同步检测与鉴别。
产品名称 | 猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒(TGEV/PEDV)检测试剂盒(双重荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P784 | 用途 | 仅供科研研究实验 |

二、 检测病原体详解说明:
TGEV和PEDV是猪场腹泻疫情中需要首要鉴别的两种病原:
临床症状:两者均引起所有日龄猪的水样腹泻、呕吐和脱水。对新生仔猪危害极大,可导致极高的死亡率(通常可达80%-100%),造成巨大的经济损失。
鉴别诊断的重要性:尽管症状相似,但病毒的遗传特性和流行病学存在差异。准确的鉴别对于追溯疫情源头、评估流行毒株以及制定针对性的防控措施(如疫苗选择)至关重要。
三、 检测原理(双重荧光PCR法):
其核心在于双重引物探针系统和双通道荧光检测。
双重引物与探针:
试剂盒中含有两套特异性引物,分别针对TGEV和PEDV高度保守的基因区域(如编码核衣壳蛋白N的基因)。
同时含有两条对应的特异性探针,每条探针都标记有不同发光颜色的荧光报告基团。例如:
FAM 标记 PEDV 特异性探针
VIC/HEX 标记 TGEV 特异性探针
一体化反应与检测:
在同一个PCR反应管中,同时进行针对TGEV和PEDV的逆转录与PCR扩增。
如果样本中含有PEDV,FAM通道的荧光信号会增长;如果含有TGEV,VIC/HEX通道的荧光信号会增长。
荧光PCR仪能够同步且独立地检测这两个通道的荧光信号变化。
结果判定:
仪器软件会分别分析两个通道的实时扩增曲线(S型曲线)和Ct值。
四、 试剂盒主要组成:
PCR反应液:包含缓冲液、dNTPs、Mg2?等。
逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。
TGEV/PEDV双重引物探针混合液(核心组分)。
阳性对照:通常含有TGEV和PEDV目标基因片段的混合质粒。
阴性对照:无核酸酶水。
内标(可选):用于监控核酸提取和PCR过程,防止假阴性。
五、 操作流程:
样本采集与处理:采集腹泻猪的粪便、肠道内容物或肛拭子,按说明书进行处理。
核酸提取:使用商业化核酸提取试剂盒从处理后的样本中提取总RNA。
配制反应体系:将提取的RNA模板、PCR反应液、酶混合物和双重引物探针混合液按比例混合于单一反应管中。
上机检测:将反应管放入荧光PCR仪,运行设定的扩增程序(通常包括:逆转录→预变性→40-45个循环的扩增)。
结果分析:软件自动分析FAM和VIC/HEX两个通道的扩增曲线,并分别给出TGEV和PEDV的检测结果。
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六、 产品特点与优势:
高效省时:一管双检,将两次独立的检测合并为一次,节省了近一半的时间、人力和试剂成本。
精准鉴别:能够明确区分TGEV和PEDV感染,为临床用药和免疫提供直接依据,避免了盲目性。
高灵敏度与特异性:针对每种病毒的引物和探针都经过精心设计和验证,互不干扰,确保了检测的准确性和可靠性。
节省样本:对于微量样本尤其有利。
快速全面:在2-3小时内即可获得一份清晰的鉴别诊断报告,有助于猪场快速响应疫情。
关键字: 猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒;检测试剂盒;双重荧光法;
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