产品介绍：
猪蓝耳病（PRRS）是目前全球养猪业危害最严重的疫病之一，临床表现为母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病。目前，我国猪场蓝耳病毒流行毒株复杂，包括经典株、高致病性变异株（如NADC30-like、NADC34-like等）。NADC30株因其NSP2基因存在特征性缺失（如131个氨基酸缺失），且易与高致病性毒株重组，致病性增强，给防控带来巨大挑战。因此，区分经典株与NADC30株对于制定精准的免疫和净化方案至关重要。
产品名称 | 猪蓝耳病毒经典型/猪蓝耳病毒NADC30株（PRRSV-C/PRRSV-NADC30）核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3998 |
基本原理
该试剂盒的核心原理是双重实时荧光定量RT-PCR（Duplex qRT-PCR），具体流程如下：
RNA提取：从待测样品（如猪的全血、血清、组织等）中提取总RNA。
逆转录与双重PCR扩增：利用针对PRRSV经典株和NADC30株特异序列设计的两对引物和两种不同荧光标记的探针（如FAM和HEX/VIC标记），在同一个反应管中同步进行逆转录和PCR扩增。
内标（IC）质控：试剂盒通常包含一个内标（Internal Control）系统（如ROX或CY5标记）。内标用于监控整个样本处理、核酸提取、逆转录及PCR扩增过程是否成功，防止因操作失误或样本中存在抑制物（如血红素）导致的假阴性结果。
实时检测与判读：在扩增过程中，随着病毒RNA逆转录生成的cDNA片段指数级增加，对应的荧光信号也随之增强。仪器实时监测各通道（FAM、VIC、CY5）的荧光信号，根据扩增曲线和设定的阈值（Ct值）判定结果。
检测靶标与特异性
靶标病毒：
猪蓝耳病毒经典型（PRRSV-C）：通常针对其ORF7基因（核衣壳蛋白N基因）或ORF5基因（囊膜糖蛋白GP5基因）的保守区域设计引物探针。该检测主要用于识别经典的VR2332-like毒株。
猪蓝耳病毒NADC30株（PRRSV-NADC30）：针对其NSP2基因的特征性缺失区域或ORF5基因的特异性变异区域设计引物探针。NADC30株的NSP2基因通常具有独特的131个氨基酸缺失，这是其重要的分子特征。
高特异性：该方法能特异性地检测PRRSV经典型和NADC30株，与猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒2型（PCV-2）、猪伪狂犬病病毒（PRV）等其他常见猪病病原体无交叉反应。
标本类型与处理
标本类型：
临床样本：猪的全血（EDTA抗凝）、血清、血浆、扁桃体、肺脏、脾脏、淋巴结等组织。
样本处理：
环境样本：猪舍的鼻拭子、咽拭子。
样本处理：
血液：取抗凝血离心后取血浆或全血直接提取RNA。
组织：需研磨成匀浆后提取RNA。
注意：样本应避免反复冻融，提取后的RNA建议立即检测或在-80℃保存。
应用价值
该双重检测试剂盒在养猪生产和疫病防控中具有重要的应用价值：
精准分型诊断：能够有效区分经典株感染和NADC30株感染，帮助兽医判断疫情性质。
流行病学监测：用于监测猪场及区域内的流行毒株变化，掌握NADC30株的流行趋势及其与经典疫苗株的相互关系。
疫苗免疫效果评估：配合疫苗免疫，监测猪群中野毒（经典株或NADC30株）的感染压力，评估免疫程序的有效性。
引种检疫与生物安全：在引种过程中，严格检测是否携带NADC30等野毒株，防止引入新的毒株破坏猪场稳定。
�� 优势与局限性
优势
一管双检，效率高：一次反应同时完成两种主要流行毒株的检测，节省了样本量、试剂成本和检测时间（通常1.5-2小时出结果）。
双重质控，结果可靠：内标（IC）系统的设置确保了实验结果的可靠性，有效避免了假阴性结果的产生。
高灵敏度与特异性：检测下限通常可达 1×10³ copies/mL，能有效检出样品中微量的病毒核酸。
指导防控：NADC30株的检测对于预警重组病毒（如NADC30与高致病性毒株重组）的出现具有重要意义。
局限性
无法区分死/活病毒：检测出阳性仅表明样品中含有病毒RNA，但无法确定病毒是否具有感染性（活病毒）。
实验室要求高：需要具备荧光定量PCR仪（需具备至少3个荧光通道）和专业的分子生物学技术人员。
RNA稳定性：病毒RNA极易降解，对样本的采集、运输和保存条件要求较高（需冷链运输，-80℃保存）。
核心优势与技术要点：
高特异性
引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。
高灵敏度
检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。
高效扩增
热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。
防污染设计
UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。
稳定性提升
冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。
公司正在出售的产品：
卷曲螺旋结构域蛋白37抗体 | C6orf204 6号染色体开放阅读框204抗体 |
心肌锚蛋白重复结构域1抗体 | AP-1μ2抗体 |
Natriuretic Peptide Receptor B 利钠肽受体B抗体 | APBB2 铁蛋白Fe65样蛋白1抗体 |
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phospho-SCNN1B (Thr615) 磷酸化上皮钠通道β2抗体 | 人高敏甲状腺素(u-T4)核酸检测试剂盒 |
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甲基丙二酸尿症和高胱氨酸尿症C型蛋白同源抗体 | 小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)核酸检测试剂盒 |
mouse CD90/PE-Cy5 PE-Cy5标记小鼠CD90单克隆抗体 | 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)PCR检测试剂盒 |
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GTPBP1 G蛋白结合蛋白1抗体 | 大鼠簇集蛋白(CLU)PCR检测试剂盒 |
ZCCHV蛋白抗体 | 土壤有机质含量（SOM）测试盒 |
小鼠生长抑素(SST)PCR检测试剂盒 | 猪蓝耳病毒经典型/猪蓝耳病毒NADC30株（PRRSV-C/PRRSV-NADC30）核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法)鹿尿酸氧化酶核酸检测试剂盒 |
大鼠双氢睾酮(DHT)PCR检测试剂盒 | 小鼠雌激素受体β(ERβ)PCR检测试剂盒 |
人白介素-4（IL-4）PCR检测试剂盒 | 猪乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)PCR检测试剂盒 |
注意事项：
防污染操作
需在试剂准备区、样本处理区、扩增区独立操作，使用带滤芯吸头及专用实验服。
阳性对照管理
浓度高达1×10⁸拷贝/μL，需单独存放并避免污染其他试剂。
局限性
仅限科研使用，不可用于临床诊断；
环境样本中可能存在PCR抑制剂，需设置内参对照。
关键字： 猪蓝耳病毒经典型/猪蓝耳病毒NADC30;PRRSV-C/PRRSV-NADC30;双重荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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