重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human CYB5R1(重组人细胞色素b5还原酶1),又称NADH-细胞色素b5还原酶1,是一种通过基因重组技术在体外表达和纯化的关键氧化还原酶。该蛋白在脂质代谢、抗氧化防御及多种疾病(如动脉粥样硬化和癌症)中扮演着核心角色。
产品名 | Recombinant Human CYB5R1 | 分子量 | 30.4 kDa |
表达区间 | 29-305 | 货号 | XG-DB1696 |
别名
b5R.1, B5R1, B5R2, CYB5R1, Cytochrome b5 reductase 1, EC 1.6.2.2, Humb5R2, NAD, NAD(P)H:quinone oxidoreductase type 3 polypeptide A2, NAD(P)H:quinone oxidoreductase type 3, polypeptide A2, NADH cytochrome b5 reductase 1, NADH-cytochrome b5 reductase 1, NB5R1_HUMAN, NQO3A2, UNQ3049/PRO9865
宿主; E.Coli
表达区间; 29-305
分子量; 30.4 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
肝特异性有机阴离子转运蛋白LST1抗体 | PE-Cy7标记人CD1a单克隆抗体 |
肿瘤易感性候选基因5抗体 | 生物素标记的绿色荧光蛋白TurboGFP单克隆抗体 |
味觉2型受体蛋白家族49抗体 | 16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 |
磷酸化叉头蛋白家族1(Ser319)抗体 | PEPCIN酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒 |
细胞冠状病毒3C类(SARS -CoV 3C-like PROTEASE)活性 | 石蜡切片冯库萨(VON KOSSA)钙染色试剂盒 |
甘油(glycerol)含量酶连续循环反应比色法 | 细胞一氧化氮合成酶总活性荧光定量检测试剂盒 |
HOECHST33342/PI简易细胞核形态染色试剂盒 | β淀粉样肽(1-42)抗体 |
细菌可溶性膜蛋白制备试剂盒 | HMGCLL1蛋白抗体 |
动物组织细胞色素P450酶体系浓度定量检测试剂盒 | FAHD1蛋白抗体 |
(L-Glutamyl-α-naphthylamide) | 硫酸软骨素多糖核心蛋白抗体 |
通用型HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性检测试剂盒 | 凋亡蛋白活性因子-1抗体(N端) |
线粒体复合物V蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 | Recombinant Human CYB5R1尤文氏肉瘤相关EWS蛋白抗体 |
肌浆网钙ATP酶1/内质网钙ATP酶1抗体 | ADP核糖基化因子结合蛋白抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: CYB5R1;30.4 kDa; 29-305;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。