大鼠神经干细胞

细胞简介：

大鼠神经干细胞分离自脑皮层组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积)；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。神经干细胞具有分化为神经神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力，能自我更新，并足以提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞，它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。需要强调的是，在脑脊髓等所有神经组织中，不同的神经干细胞类型产生的子代细胞种类不同，分布也不同。神经干细胞作为干细胞的一种，它具有其它所有干细胞的基本特征：具有自我维持和自我更新能力，具有多种分化潜能，具有分化为本系统大部分类型细胞的能力，这种自我更新和分化潜能可以维持相当长的时间甚至终生，对损伤和疾病具有反应能力。神经干细胞在疾病、损伤状态下具有增殖、迁移，并向神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的能力，已成为神经系统损伤修复和再生研究的热点，体外建立稳定的神经干细胞培养模型是其基础和临床应用的前提。神经干细胞在培养3-4d后，可形成神经球，神经球在培养基中呈悬浮生长，予以更换半量培基，1周后用吸管轻柔吹打球形克隆成为小的神经球和单细胞悬液，将部分细胞接种到新的培养瓶中，2×10⁵个细胞/瓶，每7-10d传代1次，每隔3d离心更换半量培养基1次，培养条件不变。

产品信息：

方法简介：实验室分离的大鼠神经干细胞采用胰蛋白酶消化后差速贴壁，结合神经干细胞专用培养基培养筛选制备而来，总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠神经干细胞经Nestin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：大鼠神经干细胞

组织来源：脑组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件

培养基含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：悬浮

细胞形态：球形

传代特性：可传2-3代

消化液：Accutase消化液：或0.25%胰蛋白酶大鼠神经干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养：

培养基选择：根据细胞类型选择专用培养基，如上皮细胞用上皮细胞培养基、成纤维细胞用成纤维细胞培养基，必要时添加血清（胎牛血清FBS常用，浓度10%-20%）、生长因子、抗生素等补充成分；培养基使用前需预热至37℃。

接种密度控制：原代细胞接种密度不宜过低，否则细胞难以分泌足够的自分泌因子支持生长，一般接种密度为1×10⁵-5×10⁵细胞/cm²；接种后轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布。

培养环境监控：保持培养箱内37℃、5%CO₂的恒定环境，定期检查培养基颜色变化（变黄说明pH下降，需及时换液）；原代细胞贴壁前避免频繁晃动培养瓶，贴壁后通常每2-3天换液一次。
原代细胞分离：

组织样本处理：取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中，避免样本干燥和温度变化；修剪时去除坏死、结缔组织等杂质，尽量减小组织块体积以提高消化效率。

消化方法选择：

酶消化法：根据组织类型选对应酶（如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织），严格控制消化温度（通常37℃）和时间，每隔5-10分钟镜下观察，避免过度消化损伤细胞。

机械分离法：适合柔软组织（如脑、肝脏），通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞，操作时动作轻柔，减少细胞机械损伤。

细胞过滤与离心：用合适孔径的细胞筛（如100-200目）过滤细胞悬液，去除未消化的组织块；离心转速通常为1000-1500rpm，时间5-10分钟，避免高速离心导致细胞破裂。

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