重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
人源重组 DREAM 蛋白(Recombinant Human DREAM),全称为下游调节元件拮抗剂调制蛋白,也被称为钾离子通道相互作用蛋白3(KChIP3),是一种在基因表达调控、神经科学及癌症研究中具有重要价值的重组蛋白。它对应于人体内的 KCNIP3 基因(Kv Channel Interacting Protein 3)所编码的蛋白质。
产品名称; Recombinant Human DREAM
别名; 4933407H12Rik, A type potassium channel modulatory protein 3, A-type potassium channel modulatory protein 3, AI413860, Calsenilin, CSEN, CSEN_HUMAN, DRE antagonist modulator, DRE-antagonist modulator, DREAM, EF hand transcription factor, KCHIP 3, KChIP3, KCNIP 3, Kcnip3, Kv channel interacting protein 3, Kv channel-interacting protein 3, MGC18289, Potassium channel interacting protein 3, R74849
宿主; E.Coli
表达区间; 1-256
分子量; 28.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
高密度脂蛋白结合蛋白抗体 | PGBD3蛋白抗体 |
桩蛋白抗体 | AF750标记的I型胶原单克隆抗体 |
同源相互作用蛋白激酶4抗体 | 体液亚硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒 |
磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体 | 原位染色试剂盒 |
体液基质金属抑制剂2(TIMP-2)活性比色法定量检测试剂盒 | 载玻片细胞αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
细胞磷酸二酯酶5(PDE5)活性荧光定量检测试剂盒 | 细胞脂肪酸费斯克勒(Fischler)染色试剂盒 |
细胞培养细菌污染定性荧光检测试剂盒 | δ氨基乙酰丙酸脱水酶抗体 |
组蛋白H3-K122(mono)甲基化检测试剂盒 | KBTBD5蛋白抗体 |
饲料氨比色法定量检测试剂盒 | EHD1蛋白抗体 |
通用型牛呼吸综合症(BRSV)基因检测试剂盒 | 内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A/肿瘤坏死因子α诱导蛋白4抗体 |
组织HHV6(HUMAN HERPESVIRUS 6)病毒定性检测试剂盒 | 蛋白激酶C结合蛋白NELL2抗体 |
冰冻切片组织IGF 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human DREAM嗅觉受体52J3抗体 |
甲基化样蛋白11抗体(N端) | Bcl-2同源拮抗剂抗体 |
关键字: DREAM;28.1 kDa; 1-256;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。