【产品介绍】
EvaBio™ DNA Transfection Reagent I 是一款性能优良的DNA转染试剂,可用于质粒DNA 的胞内递送和基因表达。它具有较强的DNA转染能力,与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒 性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
【转染步骤】
以24孔板为例, 1. 细胞接种: 每 孔 接 种0.5~1.0×10 5个细胞,细胞培养 12~24小时,使转染时细胞密度达到 60~70%融合度; 2.mRNA稀释: 将0.5µg的mRNA加入到Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL 3.转染试剂稀释: 取1μL的EvaBio™ DNA Transfection Reagent I (ET0203)加入到9μL的 Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL; 4.复合物制备:将上述mRNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟; 5.将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养18~48小时后检测转染效率,无需更 换培养基。
【细胞转染步骤】
mRNA的转染优化: 可通过改变细胞密度、 mRNA浓度以及EvaBio™ DNA Transfection Reagent I(ET0203) 浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,EvaBio™ DNA Transfection Reagent I(ET02 03)(µL): mRNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整 【
储存条件及保质期】 2-8℃保存,有效期12个月Evacell
不同培养板所需转染试剂和mRNA的用量
【适用范围】 EvaBio™ DNA Transfection Reagent I 转染试剂可适用于众多易转染细胞株的质粒DNA转染、 瞬时转染及稳定转染细胞的构建。适用于多种贴壁细胞系,特 别 适 用 于 各 种 常 规 细 胞 如 HeLa、293T、COS7、CHO和B16F10等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。 【注意事项】 1.本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。 2.细胞状态:使用健康、低代数的细胞,状态差会显著降低转染效率。 3. 无菌操作:全程在超净台内操作,避免污染。 4. 试剂保存:转染试剂需 2-8℃或-20℃避光保存,避免反复冻融。 5. 血清影响:部分转染试剂需在无血清条件下进行,转染后可补加血清。 6. 毒性控制:若细胞死亡明显,可减少试剂用量或缩短复合物作用时间
伊娃(苏州)生物科技有限公司
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晨曦