【产品介绍】
EvaBio™ DNA Transfection Reagent II 是一款高性能、高品质的通用型基因转染试剂 ,既 可用于传送质粒 DNA ,又具有较强的 RNA 转染能力。与其它转染试剂相比 , 具有不受血清影响、 转染效率高 ,细胞毒性低、操作便捷 ,结果稳定可重复性等优点。
【质粒DNA的转染步骤】 以24孔板为例, ① 细胞接种: 每 孔 接 种0.5~1.0 ×10 5个细胞 ,细胞培养 12~24小时 ,使转染时细胞密 度达到60~70%融合度; ② 质粒DNA/SiRNA稀释: 将0.5µg的质粒DNA(或15pmol siRNA)加入到Opti-MEM培养 基中 ,稀释后的终体积为10µL ③ 转染试剂稀释: 取1μL的EvaBio™ DNA Transfection Reagent II(ET0303) 加入到 9μL的Opti-MEM培养基中 ,稀释后的终体积为10µL; ④ 复合物制备:将上述质粒DNA(或siRNA)稀释液和转染试剂稀释液混合 ,轻轻吹打均匀后 ,室温静置10分钟 ⑤ 将上述20µL复合物加入到24孔板中 ,轻轻吹打混匀 ,继续培养18~48小时后检测转染 效率 ,无需更换培养基。
质粒DNA和siRNA的转染优化: 可 通 过 改 变 细 胞 密 度 、DNA/siRNA 浓 度 以 及 EvaBio ™ DNA Transfection Reagent II(E T0303)浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,EvaBio™ DNA Transfection Reagent II(ET0303)(µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整 ;EvaBio ™ DNA Transfection Reagent II ( ET0303 )(µL): siRNA (pmol)可 以 在0.02:1和0.15:1之间调整;
【储存条件及保质期】 2-8℃保存 ,有效期12个月
不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
【适用范围】 EvaBio™ DNA Transfection Reagent II 转染试剂可适用于众多较难转染细胞株的质粒 DNA/siRNA的转染。适用于多种贴壁细胞 ,特别适用于各种较难转细胞如L929、 NIH3T3 、MCF-7和A549等 ,均可得到较高的转染效率 ,且重复性好。
【注意事项】 1.本产品仅限于科学实验研究使用 ,不得用于临床诊断、治疗等领域。 2.细胞状态:使用健康、低代数的细胞 ,状态差会显著降低转染效率。 3. 无菌操作:全程在超净台内操作,避免污染。 4. 试剂保存:转染试剂需 2-8℃或-20℃避光保存** ,避免反复冻融。 5. 血清影响:部分转染试剂需在无血清条件下进行 ,转染后可补加血清。 6. 毒性控制:若细胞死亡明显 ,可减少试剂用量或缩短复合物作用时间
伊娃(苏州)生物科技有限公司
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晨曦