细胞简介:

大鼠肺成纤维分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持肺器官的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品名称 | 大鼠肺成纤维细胞 | 组织来源 | 肺组织 |
英文名称 |
| 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4731 | 生长特性 | 贴壁 |

产品信息:

产品名称 大鼠肺成纤维细胞
组织来源 肺组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的大鼠肺成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠肺成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠肺成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤:

1. 细胞复苏
运输与接收:细胞以液氮冻存形式运输,收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶,置于超净台内无菌操作。
复苏操作:将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态,显微镜下观察细胞形态和密度,记录初始状态(建议40x、100x、200x各拍一张照片)。
2. 细胞传代
传代时机:当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤:
弃去旧培养基,用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(1-2 mL),37℃孵育1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心(1000 RPM,5分钟),弃上清,用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代(如T25瓶分至两个T25瓶),补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率:每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液:使用无血清冻存液。
冻存步骤:细胞传代后,用胰蛋白酶消化并离心,重悬于冻存液,缓慢降温至-80℃,最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品:
人胎盘绒毛膜滋养层细胞 Human Placental Chorionic Trophoblast Cells | BJ5183细菌 |
HLC-1细胞 | RNA电泳样品处理液 |
组织基质金属(MMP)总活性荧光定量检测试剂盒 | 体液脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量检测试剂盒 |
全组织衰老特异性脂褐素尼罗篮原位染色试剂盒 | 细胞PAR-3蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
HHV病毒DNA纯化试剂盒 | 脑胶质瘤相关蛋白抗体(锌指蛋白5) |
心脏钙粘蛋白重组兔单克隆抗体 | 促进调解蛋白家族2A抗体 |
环指蛋白128抗体 | 嗅觉受体5D14抗体 |
分子伴侣CESK1蛋白抗体 | 灵芝烯酸B100665-41-6 |
植烷酸氧化酶抗体 | 4'-甲氧基沉香四醇123278-01-3 |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK8抗体 | 土曲菌素582-46-7 |
EMB蛋白抗体 | 大鼠肺成纤维细胞二氢辣椒碱19408-84-5 |
细胞氢过氧化物(HYDROPEROXIDE)活性硫氰酸盐(THIOCYANATE)比色法定量检测试剂盒 | 大鼠结膜囊成纤维细胞 Primary rat conjunctival sac fibroblasts |
通用型肠杆菌(Enterobacteriacea STX2)基因检测试剂盒 | TC-1小鼠肺上皮细胞 |
产品注意事项:
无菌操作是生命线:所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行,使用专用试剂和耗材,防止交叉污染。
消化是关键步骤:
控制时间:使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时,严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止,避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择:部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶,也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的,可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子:
基础培养基:推荐使用专用培养基(如EGM-2 MV BulletKit)。若使用DMEM/F12等基础培养基,需补充10-20%胎牛血清(FBS)及抗生素(如青霉素/链霉素)。
生长因子:为促进生长,可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养(一瓶用原装完全培养基,一瓶用自配培养基)。
细胞密度与传代:
最佳传代密度:建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代,避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理:若细胞生长不均,成岛状分布,可将细胞消化后重新打散,加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理:
定期检查:定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理:若发现污染,需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗,但严重污染时建议弃置细胞。
关键字: 大鼠肺;成纤维细胞;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。