细胞简介：
大鼠食管成纤维分离自食管组织；食管是咽和胃之间的消化管，食管在系统发生上起初很短，随着颈部的伸长和心肺的下降，而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，食管使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，黏膜层，包括上皮、固有层和黏膜肌层。食管的外膜，由疏松结缔组织构成，富有血管、淋巴管及神经。主要包含食管成纤维细胞，成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品名称 | 大鼠食管成纤维细胞 | 组织来源 | 食管 |
英文名称 | Rat Esophageal Fibroblast Cells | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4763 | 生长特性 | 贴壁 |
产品信息:
产品名称 大鼠食管成纤维细胞
组织来源 食管
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 实验室分离的大鼠食管成纤维采用 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的大鼠食管成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培养基：基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传2-3代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠食管成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤：
1. 细胞复苏
运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。
复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。
2. 细胞传代
传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤：
弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率：每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液：使用无血清冻存液。
冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品：
人呼吸道上皮细胞 Human Respiratory Epithelial Cells | 植物异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase；IDH） |
LMSU细胞 | Trypanosoma congolense RFLP基因分析试剂盒 |
细胞基质金属9（MMP9）原位明胶酶谱法（in situ ?zymography）荧光染色试剂盒 | 细菌血液琼脂平板 |
动物脂肪组织细胞分离培养试剂盒 | 细胞CASPASE-10蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
总微型RNA（miRNA）电泳法分离试剂盒 | 鳞状细胞癌相关蛋白抗体 |
小鼠抗人CD19单克隆抗体 | 单核细胞趋化蛋白2抗体 |
环指蛋白67抗体 | 乙酰辅酶A羧化酶1/ACCα抗体 |
果糖-2,6-二磷酸酶4抗体 | 柚皮素-7-O-葡萄糖苷529-55-5 |
转录因子E2F-3抗体 | 薯蓣次皂苷A 重楼皂苷V19057-67-1 |
同源盒蛋白C6抗体 | 6,7-二羟基-4-(三氟甲基)香豆素82747-36-2 |
FITC标记人CD25单克隆抗体 | 大鼠食管成纤维细胞马鞭草苷548-37-8 |
人血液C－反应蛋白（C-RP）免疫比浊法定量检测试剂盒 | 人宫颈平滑肌细胞 Human primary cervical smooth muscle cells |
转基因玉米MON809品系基因检测试剂盒 | U251 MG (KO)人类星形胶质细胞瘤细胞 |
产品注意事项：
无菌操作是生命线：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行，使用专用试剂和耗材，防止交叉污染。
消化是关键步骤：
控制时间：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时，严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止，避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择：部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子：
基础培养基：推荐使用专用培养基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基础培养基，需补充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/链霉素）。
生长因子：为促进生长，可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养（一瓶用原装完全培养基，一瓶用自配培养基）。
细胞密度与传代：
最佳传代密度：建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代，避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理：若细胞生长不均，成岛状分布，可将细胞消化后重新打散，加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理：
定期检查：定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理：若发现污染，需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗，但严重污染时建议弃置细胞。
关键字： 大鼠食管;成纤维细胞;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域，利用互联网、数据分析及自动化技术，包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品，截止至2024年5月，西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景，西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力，更加重视本土化，建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活，能快速响应客户需求的产品。