产品介绍:

pdmH1N1(HA)/H3N2(HA)/BV/BY 亚型流感病毒核酸检测试剂盒是一种四重/五重实时荧光RT-PCR检测试剂盒。它能够在一个反应管内,通过一次检测,同时区分并鉴定四种(或五种)最常见的季节性流感病毒亚型/谱系。
这种试剂盒是目前临床呼吸道感染鉴别诊断中的“黄金标准”工具,特别适用于流感高发季节,帮助医生快速判断具体是哪种病毒导致了患者感染。
产品名称 | pdmH1N1(HA)/H3N2(HA)/BV/BY 亚型流感病毒核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3026 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
以下为您详解该试剂盒的技术细节与应用:
检测目标与临床意义

该试剂盒的设计覆盖了当前在人群中共同流行的流感病毒主要分支,实现“一管测四病”:
A/pdmH1N1 (2009甲型H1N1):
靶标: HA基因(血凝素)。
意义: 特异性区分2009年大流行以来的新型甲型H1N1病毒,区别于旧的季节性H1N1。
A/H3N2 (季节性甲型H3N2):
靶标: HA基因。
意义: H3N2亚型变异频繁,常导致较严重的流感疫情,尤其对老年人威胁较大。
BV (乙型流感 Yamagata 系):
靶标: 特异性基因片段(通常为HA或NS基因)。
意义: 乙型流感的两个主要谱系之一。
BY (乙型流感 Victoria 系):
靶标: 特异性基因片段。
意义: 乙型流感的另一主要谱系。由于两系之间缺乏交叉免疫,试剂盒通常会将它们分开检测。
(可选) 甲型通用 (Flu A):
部分试剂盒设计包含一个针对甲型流感M基因的通用通道,用于确认所有甲型流感(包括上述H1N1和H3N2)。
检测原理:多重 TaqMan 荧光探针法

试剂盒利用一步法多重实时荧光RT-PCR技术,通过不同颜色的荧光标记来区分不同的病毒靶标。
逆转录 (RT): 将样本中的病毒RNA逆转录成cDNA。
多重PCR扩增: 在同一个反应管中,针对上述四种(或五种)病毒的特异性基因片段同时进行扩增。
荧光信号采集:
通道1 (FAM): 通常标记 A/pdmH1N1。
通道2 (VIC/HEX): 通常标记 A/H3N2。
通道3 (CY5/ROX): 通常标记 BV (Yamagata)。
通道4 (CY5.5/Quasar): 通常标记 BY (Victoria)。
内标通道 (Quasar670/CY5): 检测人源基因(如RNase P),确认样本采集成功(含有足量人细胞)。
结果判读: 仪器根据Ct值(循环阈值)判定。若某通道的扩增曲线穿过阈值线(通常Ct ≤ 38-40),则判定该病毒为阳性。
�� 典型性能优势

高效率: 一次检测完成四种病毒的分型,大大节省了实验室时间、人力和样本量。
高特异性: 各通道之间互不干扰,能够精准区分甲型和乙型,以及乙型的两个谱系。
灵敏度高: 检测下限通常可达 10³ - 10⁴ copies/mL,能够检测出早期或低载量的混合感染。
混合感染检测: 能够发现是否存在两种或多种流感病毒同时感染的情况(例如同时感染H3N2和BV)。
�� 样本要求
类型: 咽拭子、鼻拭子、鼻咽吸取物、痰液、肺泡灌洗液等。
质量控制: 内标(Internal Control)必须为阳性,说明样本采集合格且PCR反应无抑制。如果内标阴性,该样本结果视为无效,需重新采样。
⚠️ 注意事项

防止污染: 多重PCR虽然高效,但对实验室环境要求更高。必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读: 核酸检测阳性代表样本中存在病毒核酸,提示现症感染。阴性结果不能完全排除感染(可能与采样时机、病毒载量低于检测限有关),需结合临床症状综合判断。
疫苗干扰: 对于接种流感减毒活疫苗(LAIV)后短期内(通常7-10天内)的检测,可能会出现弱阳性或假阳性结果,需注意询问接种史。
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主要应用:

转基因作物检测:快速筛查Bt棉花、Bt玉米等
食品/饲料监管:标识转基因成分是否符合法规(如中国GB 2760、欧盟EC 1829/2003)
环境监测:土壤或农产品中Bt基因残留分析
操作流程
样本处理:研磨植物组织或均质化食品样本
DNA提取:推荐CTAB法或商业化提取试剂盒
PCR扩增:
反应体系:20 μL(含15 μL反应液+5 μL DNA模板)
扩增程序:95℃ 2min → (95℃ 15s → 60℃ 30s)×40循环
关键字: pdmH1N1 ;亚型流感病毒;检测试剂盒;
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