产品介绍:
H6 亚型流感病毒核酸检测试剂盒是一种专门用于体外定性检测甲型流感病毒 H6 亚型(IAV-H6)核酸的分子诊断工具。该试剂盒主要基于实时荧光 RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)技术,通过特异性扩增病毒的血凝素(HA)基因片段,实现对 H6 亚型病毒的精准识别。
产品名称 | H6 亚型流感病毒核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3038 |
检测原理
该试剂盒的核心原理是TaqMan 荧光探针法实时荧光 RT-PCR:
逆转录 (RT): 由于流感病毒是 RNA 病毒,试剂盒首先利用逆转录酶将样本中的病毒 RNA 合成互补的 DNA (cDNA)。
荧光 PCR 扩增: 在 PCR 反应体系中,加入针对 H6 亚型 HA 基因保守区域设计的特异性引物和荧光标记的探针。
当 PCR 扩增发生时,DNA 聚合酶会切断探针,使报告荧光基团与淬灭荧光基团分离,从而释放出荧光信号。
实时监测: 仪器实时监测荧光信号的累积。若样本中存在 H6 亚型病毒核酸,荧光信号会随循环数增加而呈指数级增长。
�� 典型性能参数
参数指标 典型数值/范围 说明
检测目标 H6-HA 基因 特异性识别甲型流感病毒 H6 亚型
检测方法 荧光 RT-PCR (探针法) 即开即用,特异性强,灵敏度高
检测限 1×10³ 拷贝/mL 最低可检测浓度
特异性 高 不与 H1、H3、H5、H7、H9 等其他流感亚型发生交叉反应
检测时间 约 60 ~ 90 分钟 视 PCR 仪程序而定
储存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存 有效期通常为 12 个月
�� 样本类型
禽类样本: 咽喉拭子、泄殖腔拭子、羽毛拭子(H6 亚型在禽类中广泛存在,是主要检测对象)。
环境样本: 活禽市场笼具表面涂抹物、污水、垫料等。
临床样本: 咽拭子、痰液、肺泡灌洗液(用于疑似人感染 H6 病例的排查)。
�� 操作流程简述
样本采集与保存: 使用无菌采样管采集样本,4℃保存并尽快送检;长期保存需置于 -70℃。
病毒 RNA 提取: 使用配套的病毒 RNA 提取试剂盒(如磁珠法或柱提法)提取核酸。
配置反应体系: 将提取的 RNA、PCR 反应液(含引物、探针、酶)按比例混合。
上机检测: 将反应管放入实时荧光 PCR 仪(如 ABI 7500、Bio-Rad CFX96 等),设置荧光通道(通常为 FAM)。
结果分析: 根据扩增曲线的 Ct 值(通常阈值设为 35-40)进行判读。
⚠️ 注意事项
生物安全: 虽然 H6 亚型主要感染禽类,但属于潜在的人畜共患病原。操作应在生物安全二级(BSL-2)实验室进行,涉及病毒培养需在更高防护级别实验室进行。操作人员需穿戴适当的个人防护装备(口罩、手套、防护服)。
防污染: PCR 检测极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、PCR 扩增区),防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。
试剂保存: 试剂盒中的酶和探针通常需在 -20℃ 避光保存,避免反复冻融。
临床意义: H6 亚型在野鸟和家禽中广泛流行。该试剂盒主要用于禽流感的流行病学监测、活禽市场检疫以及人感染禽流感的早期筛查。检测结果需结合流行病学史和临床症状综合判断。
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注意事项:
1、严防污染
分区操作:必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样,避免气溶胶交叉污染。
专用耗材:使用无核酸酶的枪头、EP管等,建议使用带滤芯枪头。
规范操作:加样后立即盖紧管盖,避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理:样本采集后应立即冷藏(2-8℃),长期保存需置于-70℃以下,避免反复冻融。
试剂保存:严格按照说明书要求的温度(通常是-20℃或2-8℃)保存试剂,避免反复冻融。
对照设置:每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照,监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全:阳性样本需按生物安全三级标准处理,实验人员需佩戴个人防护装备(PPE)。
废弃物处理:所有废弃物(包括耗材、样本)需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
关键字: H6 ;亚型流感病毒核;检测试剂盒;
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