产品介绍:
H12亚型流感病毒核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测H12亚型流感病毒核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)技术,主要用于科研、野生动物疫病监测及病毒库的流行病学调查。
产品名称 | H12 亚型流感病毒核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3044 |
检测原理
该试剂盒的核心原理是实时荧光RT-PCR(TaqMan探针法)。
逆转录(RT):将提取的病毒RNA逆转录为cDNA。
特异性扩增:针对H12亚型流感病毒的血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物和探针。
荧光检测:反应体系中包含标记荧光基团(如FAM)的特异性探针。在PCR扩增过程中,随着目标基因的指数级扩增,荧光信号也随之增强,仪器实时监测信号以判定结果。
内参质控:通常会同时检测人源基因(如RNaseP)或通用型甲型流感M基因,以监控样本采集质量和排除PCR抑制物的影响。
核心组成
试剂盒通常包含以下关键组分:
PCR反应液:含缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、特异性引物和荧光标记探针(针对H12-HA基因)。
酶混合液:含逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。
阳性对照:含有H12亚型目标基因片段的质粒或假病毒。
阴性对照:无核酸酶的水。
内参体系:用于检测内参基因的引物和探针(部分试剂盒包含)。
适用样本与操作流程
适用样本类型:
野生动物样本:主要存在于野生水鸟(如鸭、雁)的咽喉拭子、泄殖腔拭子。
环境样本:湖泊水样、湿地环境涂抹样本。
标准操作流程:
样本采集:使用无菌拭子采集呼吸道或消化道分泌物。
病毒RNA提取:使用病毒RNA提取试剂盒提取总RNA。
体系配置:将提取的RNA、PCR反应液和酶液按比例混合。
上机扩增:在荧光定量PCR仪上运行程序。
结果分析:根据扩增曲线和Ct值判定结果。
✨ 产品特点
高特异性:专门针对H12亚型设计,与其他HA亚型(H1-H16)无交叉反应。
高灵敏度:最低检测限通常可达 10³ copies/mL。
科研导向:由于H12主要在野生动物中传播,该试剂盒主要用于病毒生态学研究和跨物种传播风险评估。
⚠️ 注意事项与储存
储存条件:试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存,避免反复冻融。
生物安全:操作野生样本时需注意生物安全防护。
结果解读:阴性结果不能完全排除感染,需结合临床症状和其他检测结果综合判断。
�� 应用意义
病毒库监测:H12亚型是野生水鸟中的常见病毒,监测有助于了解流感病毒在自然界的遗传多样性。
跨种传播研究:虽然H12主要感染禽类,但对其进行监测有助于评估其突破种属屏障感染哺乳动物的潜在风险。
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注意事项:
1、严防污染
分区操作:必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样,避免气溶胶交叉污染。
专用耗材:使用无核酸酶的枪头、EP管等,建议使用带滤芯枪头。
规范操作:加样后立即盖紧管盖,避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理:样本采集后应立即冷藏(2-8℃),长期保存需置于-70℃以下,避免反复冻融。
试剂保存:严格按照说明书要求的温度(通常是-20℃或2-8℃)保存试剂,避免反复冻融。
对照设置:每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照,监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全:阳性样本需按生物安全三级标准处理,实验人员需佩戴个人防护装备(PPE)。
废弃物处理:所有废弃物(包括耗材、样本)需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
关键字: H12 ;亚型流感病毒;检测试剂盒;
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