产品介绍：
鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii, AB）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测临床样本中鲍曼不动杆菌核酸的分子诊断工具。该试剂盒主要基于实时荧光PCR（聚合酶链式反应）技术，利用探针法对细菌DNA进行特异性扩增和检测。
产品名称 | 鲍曼不动杆菌核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3086 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
检测原理
该试剂盒的核心原理是TaqMan荧光探针法实时荧光PCR：
样本处理： 从痰液、血液、脑脊液或病灶组织等样本中提取细菌DNA。
PCR扩增： 试剂盒内含针对鲍曼不动杆菌特异性基因（如 gyrB 基因或 16S rRNA 基因）设计的一对特异性引物和一条特异性探针。
信号检测： 在PCR扩增过程中，随着目标DNA片段的指数级增加，荧光探针被酶切，释放出荧光信号（通常为FAM通道）。仪器实时监测荧光信号的累积，从而判断样本中是否存在鲍曼不动杆菌核酸。
�� 典型性能参数
参数指标 典型数值/范围 说明
检测目标 鲍曼不动杆菌 DNA 靶向 gyrB 或 16S rRNA 基因
检测方法 荧光PCR法（探针法） 特异性高，避免非特异扩增
检测限 500 ～ 900 CFU/mL 灵敏度高，可检出低菌量感染
检测时间 约 2 ～ 2.5 小时 远快于传统培养法（48-72小时）
储存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存 有效期通常为12个月
适用仪器 ABI 7500、LightCycler 480等 需支持FAM荧光通道的荧光PCR仪
�� 样本类型
痰液/肺泡灌洗液： 最常见的样本类型，用于下呼吸道感染（如肺炎）的诊断。
血液： 用于检测菌血症或败血症。
脑脊液： 用于诊断中枢神经系统感染（如脑膜炎）。
病灶组织/分泌物： 用于伤口感染或脓肿的病原学诊断。
�� 操作流程简述
样本采集： 无菌采集患者的痰液、血液或脑脊液等样本。
核酸提取： 使用配套的细菌基因组DNA提取试剂盒（磁珠法或离心柱法）提取样本中的总DNA。
配置体系： 将提取的DNA、PCR反应液（含引物、探针、酶）按比例混合。
上机检测： 将反应管放入荧光PCR仪，设置好反应程序（通常为40个循环）和荧光通道（FAM）。
结果分析： 根据扩增曲线的Ct值（通常阈值设为35-40）判读阳性或阴性。
⚠️ 注意事项
临床意义： 鲍曼不动杆菌是医院获得性肺炎（HAP）、呼吸机相关性肺炎（VAP）和重症监护室（ICU）感染的主要病原体之一。它具有极强的耐药性（如CR-AB），核酸检测能实现早期快速诊断，帮助临床医生在培养结果出来前及时调整抗生素方案。
生物安全： 操作应在生物安全二级（BSL-2）实验室进行，穿戴适当的个人防护装备。
防污染： 必须严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区），防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。
结果解读： 阳性结果提示存在鲍曼不动杆菌感染，但需结合临床表现和其他检查（如药敏试验）综合判断。阴性结果不能完全排除感染，可能与采样不当或细菌载量过低有关。
公司正在出售的产品：
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操作步骤：
整个流程遵循“样本处理 → 试剂配制 → 加样 → 上机检测 → 结果分析”的逻辑，核心是防污染和精准操作。
1. 样本处理 (核酸提取)
样本：鼻咽拭子、咽拭子或痰液样本。
裂解：将拭子浸入裂解液，充分混匀后室温静置10分钟。
提取：采用磁珠法或离心柱法提取总RNA，严格按照试剂盒说明书操作。
保存：洗脱后的RNA应立即使用或分装保存于-80℃。
2. 试剂配制与加样
反应体系准备：在试剂准备区配制Master Mix。根据待检测样本数计算总体积，通常按样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照的原则来配制。
推荐体系：例如，使用20μL体系的试剂盒，可包含qPCR预混液16μL、引物探针混合液4μL（具体体积请以实际说明书为准）。
分装：将配好的反应体系分装至PCR反应管中（如20μL/管）。
加样：在样本处理区，分别向反应管中加入5μL的模板RNA（样本、阳性质控、阴性质控）。盖紧管盖，短暂离心，避免污染和气泡。
3. 上机检测
运行程序：将反应管放入荧光定量PCR仪，运行预设程序。典型程序包括：
逆转录：50℃，15分钟（将RNA逆转录为cDNA）。
预变性：95℃，10分钟（激活Hot-Start Taq酶）。
扩增循环：通常为40个循环，每个循环包括变性（95℃，15秒） 和 退火/延伸（60℃，45秒），仪器在退火/延伸步骤同时采集荧光信号。
信号监测：仪器实时监测荧光信号变化，生成扩增曲线。
4. 结果分析与判定
Ct值：仪器根据荧光曲线自动计算阈值循环数（Ct值）。
结果判定：
阳性：样本Ct值 ≤ 37（具体阈值请以试剂盒说明书为准），且扩增曲线呈典型"S"型。
阴性：样本无Ct值或Ct值 > 40。
无效：阳性对照无Ct值或Ct值 > 35，或阴性对照有Ct值，需重新检测。
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