产品介绍：
肠杆菌科耐碳青霉烯类抗菌药物基因（KPC）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测肠杆菌科细菌（如肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌等）中是否存在KPC型碳青霉烯酶基因的分子诊断工具。该试剂盒主要用于快速筛查“超级细菌”——耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE），对临床感染控制和合理用药具有重要意义。
产品名称 | 肠杆菌科耐碳青霉烯类抗菌药物基因( KPC)核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3099 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
�� 试剂盒核心原理
该试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通常采用TaqMan荧光探针法。
核酸提取：从临床样本（如痰液、直肠拭子）或纯培养菌落中提取细菌基因组DNA。
双重检测系统：
FAM通道（检测靶标）：针对KPC基因（bla_KPC）的保守区域设计特异性引物和探针，用于检测是否存在KPC型碳青霉烯酶基因。
HEX/VIC通道（内标/质控）：部分试剂盒会同时检测肠杆菌科细菌的保守基因（如phoA、16S rRNA或phoE），用于监控样本中是否存在足量的细菌DNA，防止因样本采集不当或提取失败导致的假阴性。
结果判定：仪器实时监测荧光信号，根据Ct值判定样本中是否含有KPC基因。
�� 典型产品参数
参数项 典型指标/说明
通用名称 肠杆菌科耐碳青霉烯类抗菌药物基因(KPC)核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
检测靶标 bla_KPC 基因（覆盖KPC-2至KPC-45等多种亚型）
检测样本 痰液、直肠拭子、菌落、肺泡灌洗液等
适用菌种 肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌等肠杆菌科细菌
检测时长 约 2-3小时（含核酸提取时间）
灵敏度 最低检测限通常可达 1×10³ 拷贝/mL
储存条件 -20℃ 避光保存，有效期12个月
组成成分
PCR反应液：含dNTPs、Mg²⁺、缓冲液、特异性引物和探针（FAM标记检测KPC，HEX标记检测内标）。
酶混合物：含热启动Taq DNA聚合酶。
阳性对照：含有KPC基因片段的质粒或灭活菌液。
阴性对照：无核酸酶水。
裂解液/提取试剂：用于细菌裂解和DNA提取。
�� 结果判读标准
KPC阳性（+）：
FAM通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值 ≤ 35-38。
内标通道（HEX）有正常扩增。
结论：样本中检出KPC型碳青霉烯酶基因，提示该菌株极可能对碳青霉烯类抗生素耐药。
KPC阴性（-）：
FAM通道无扩增曲线，或Ct值 > 38-40。
内标通道（HEX）有正常扩增（说明样本有效）。
结论：样本中未检出KPC型碳青霉烯酶基因。
无效/重做：
阳性对照未扩增，或内标通道未扩增（提示样本采集失败或提取失败），需重新采样检测。
⚠️ 注意事项与临床意义
临床意义重大：KPC型碳青霉烯酶是导致肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素（如美罗培南、厄他培南）耐药的最主要机制之一。快速检测出KPC基因，有助于临床医生立即采取隔离措施，防止耐药菌在医院内暴发流行，并指导使用替加环素、多粘菌素等特效药物进行治疗。
耐药机制复杂：细菌对碳青霉烯类耐药除了KPC酶外，还可能由NDM（金属酶）、OXA-48等其他酶引起。因此，KPC基因阴性不代表该细菌一定对碳青霉烯类药物敏感，可能携带其他耐药基因。
定性检测：该试剂盒仅检测基因是否存在，不直接反映细菌是否存活。对于治疗后的患者，即使细菌已被杀死，样本中仍可能残留DNA导致阳性。
生物安全：操作痰液、菌落等感染性物质时，应在BSL-2实验室中进行，并做好个人防护。
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主要应用：
转基因作物检测：快速筛查Bt棉花、Bt玉米等
食品/饲料监管：标识转基因成分是否符合法规（如中国GB 2760、欧盟EC 1829/2003）
环境监测：土壤或农产品中Bt基因残留分析
操作流程
样本处理：研磨植物组织或均质化食品样本
DNA提取：推荐CTAB法或商业化提取试剂盒
PCR扩增：
反应体系：20 μL（含15 μL反应液+5 μL DNA模板）
扩增程序：95℃ 2min → (95℃ 15s → 60℃ 30s)×40循环
关键字： KPC;肠杆菌科耐碳青霉烯类抗菌药物基因 ;检测试剂盒;
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