产品介绍：
肠杆菌科耐碳青霉烯类抗菌药物基因（KPC/NDM/OXA）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测临床样本中肠杆菌科细菌耐药基因的分子诊断工具。该试剂盒主要用于快速检测导致细菌对碳青霉烯类抗生素耐药的关键基因，帮助临床及时识别“超级细菌”感染。
产品名称 | 肠杆菌科耐碳青霉烯类抗菌药物基因( KPC/NDM/OXA)核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3104 |
检测原理
该试剂盒的核心原理是实时荧光PCR（qPCR）技术，通常采用多重荧光探针法，能够在同一个反应体系中同时检测多个靶标。
检测靶标：
blaKPC 基因： 编码KPC型碳青霉烯酶，主要存在于肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌中。
blaNDM 基因： 编码NDM型金属β-内酰胺酶，具有极强的水解能力。
blaOXA 基因： 编码OXA型碳青霉烯酶，常见于鲍曼不动杆菌，但在肠杆菌科中也逐渐增多。
内标（IC）： 试剂盒通常包含一个内参基因（如肠杆菌科保守基因 phoA 或外源性内标），用于监控核酸提取和扩增过程是否正常，防止假阴性。
多重检测： 通过使用不同荧光素（如FAM、HEX/VIC、CY5等）标记的特异性探针，仪器可以区分不同的耐药基因。
�� 典型性能参数
参数指标 典型数值/范围 说明
检测目标 blaKPC、blaNDM、blaOXA 基因 覆盖主要的碳青霉烯酶基因
检测方法 荧光PCR法（多重探针法） 闭管操作，污染风险低
检测限 1×10³ 拷贝/mL 灵敏度高，可检出低载量样本
检测时间 约 1.5 - 2 小时 远快于传统培养+药敏（2-3天）
储存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存 有效期通常为12个月
�� 样本类型
直肠拭子： 用于筛查肠道定植菌（主动筛查，防止院内交叉感染）。
痰液/支气管肺泡灌洗液： 用于诊断呼吸道感染。
血液： 用于血流感染的辅助诊断（通常需结合血培养瓶报警后检测）。
伤口分泌物/尿液： 用于其他部位感染的病原学检测。
�� 操作流程简述
样本采集： 使用无菌拭子或无菌容器采集样本。
核酸提取： 使用细菌基因组DNA提取试剂盒（磁珠法或柱提法）提取总DNA。
配置反应体系： 将提取的DNA与PCR反应液（含引物、探针、酶）混合。
上机检测： 放入实时荧光PCR仪（如ABI 7500、LightCycler 480等），设置好对应的荧光通道。
结果分析： 仪器根据扩增曲线的Ct值自动判读各靶标基因是否为阳性。
⚠️ 注意事项
临床意义： 肠杆菌科细菌（如肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌）一旦携带这些基因，通常对碳青霉烯类抗生素（如亚胺培南、美罗培南）耐药，治疗选择极为有限（仅剩替加环素、黏菌素或头孢他啶/阿维巴坦等）。快速检测有助于临床医生尽早调整抗生素方案，隔离定植患者，控制院内感染爆发。
生物安全： 操作应在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。
结果解读： 阳性结果提示样本中存在该耐药基因，但不能直接等同于致病菌（可能是定植菌）。阴性结果不能完全排除耐药菌感染（可能存在未知的耐药机制或样本中细菌载量过低）。检测结果需结合患者临床症状、细菌培养结果及其他药敏数据综合判断。
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注意事项：
1、严防污染
分区操作：必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样，避免气溶胶交叉污染。
专用耗材：使用无核酸酶的枪头、EP管等，建议使用带滤芯枪头。
规范操作：加样后立即盖紧管盖，避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理：样本采集后应立即冷藏（2-8℃），长期保存需置于-70℃以下，避免反复冻融。
试剂保存：严格按照说明书要求的温度（通常是-20℃或2-8℃）保存试剂，避免反复冻融。
对照设置：每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照，监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全：阳性样本需按生物安全三级标准处理，实验人员需佩戴个人防护装备（PPE）。
废弃物处理：所有废弃物（包括耗材、样本）需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
关键字： 肠杆菌科耐碳青霉烯类抗菌药物基因;KPC/NDM/OXA;检测试剂盒;
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