产品介绍:
五种致泻性大肠埃希菌核酸检测试剂盒(Diarrheagenic Escherichia coli Detection Kit)是基于多重PCR技术(Multiplex PCR)设计的分子诊断工具。它能够在一个反应体系中,同时检测并区分五种主要的致泻性大肠埃希菌(DEC),包括肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)、肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)和肠粘附性大肠埃希菌(EAEC)。
产品名称 | 五种致泻性大肠埃希菌核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3105 |
�� 病原体背景与临床/食安意义
致泻性大肠埃希菌是全球范围内引起食源性腹泻的重要病原菌,尤其在儿童中发病率较高。根据其致病机制和毒力因子的不同,通常分为以下五种主要类型:
肠出血性大肠埃希菌(EHEC): 又称产志贺毒素大肠埃希菌(STEC),能产生志贺毒素(Stx),可导致出血性结肠炎,严重时引发溶血性尿毒综合征(HUS),其中O157:H7是最著名的血清型。
肠致病性大肠埃希菌(EPEC): 主要引起婴儿腹泻,通过“ attaching and effacing”(A/E)病变破坏肠黏膜。
肠产毒性大肠埃希菌(ETEC): 产生不耐热肠毒素(LT)和/或耐热肠毒素(ST),引起霍乱样水样腹泻,是“旅游者腹泻”的常见原因。
肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC): 能侵袭肠上皮细胞,引起痢疾样症状(发热、腹痛、脓血便)。
肠粘附性大肠埃希菌(EAEC): 在肠黏膜上呈“堆叠砖样”粘附,引起持续性腹泻。
检测原理:多重PCR技术
该试剂盒的核心优势在于“一管多检”,通过设计针对不同菌型特异性毒力基因的引物和探针,实现同步筛查。
多重实时荧光PCR(TaqMan探针法):
原理: 在一个反应管中加入多对特异性引物和不同荧光标记(如FAM、VIC、CY5等)的探针。
检测目标: 例如,EHEC检测stx1/stx2和eae基因;ETEC检测elt和est基因;EPEC检测eae和bfpB基因;EIEC检测invE或ipaH基因;EAEC检测aggR或pic基因。
内标: 通常包含一个检测大肠埃希菌种属特异性基因(如uidA或gyrB)的通道,用于确认样本中是否存在大肠杆菌DNA,防止假阴性。
熔解曲线分析技术:
部分试剂盒采用此技术,通过检测不同基因扩增产物的熔解温度(Tm值)差异来区分不同的致泻菌型。
结果判读: 根据不同荧光通道的扩增曲线(Ct值)和/或熔解曲线峰,自动判定样本属于哪种或哪几种致泻性大肠埃希菌。
试剂盒组成
标准配置通常包含以下组分:
组分名称 主要成分与功能
PCR反应液 含dNTPs、Mg²⁺、缓冲液。
酶混合液 含热启动Taq酶(荧光法)或DNA聚合酶(普通PCR法)。
引物/探针混合物 预混液,包含针对5种DEC及内标的特异性引物和探针。
阳性对照 含5种DEC混合基因片段的质粒或灭活菌液。
阴性对照 无核酸酶水,用于监控污染。
�� 样本要求与处理
适用样本:
临床样本: 粪便、肛拭子。
食品/环境样本: 可疑食品(如生肉、蔬菜)、水体样本。
前处理流程:
增菌(食品/环境样本必需): 按照国标(如GB 4789.6)进行前增菌和选择性增菌。
DNA提取: 可使用试剂盒配套的DNA提取试剂,或采用煮沸法、磁珠法提取模板DNA。
�� 性能特点
高特异性: 能准确区分5种DEC,不与沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌等其他肠道菌发生交叉反应。
高灵敏度: 最低检测限通常可达 10³ CFU/mL(约100-1000个细菌/毫升),显著高于传统培养法。
快速高效: 整个检测流程(含增菌和DNA提取)通常在4-6小时内完成,远快于传统生化鉴定(需2-3天)。
⚠️ 注意事项
生物安全: 操作粪便或细菌培养物需在生物安全二级(BSL-2)实验室进行。
防止污染: 由于PCR技术极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),防止气溶胶污染导致假阳性。
结果解读:
阳性: 提示样本中存在该型致泻性大肠埃希菌的特异性基因。对于EHEC,检测出stx基因即具有重要临床意义。
阴性: 不能完全排除感染(可能因细菌载量低于检测限或样本采集不当)。对于临床疑似病例,建议结合培养法或血清学检测复核。
公司正在出售的产品:
水通道蛋白-9抗体 | human CD14/PerCP-Cy5.5 PerCP-Cy5.5标记人CD14单克隆抗体 |
转录因子WSTF抗体 | PE-Cy5标记小鼠CD45R单克隆抗体 |
MBOAT1 溶血磷脂酰酰基转移酶1抗体 | Caspr2 轴突相关CNTP2蛋白抗体(少突胶质细胞) |
C型凝集素结构域家族6成员A抗体 | 小鼠吡啶交联物(PY)PCR检测试剂盒 |
NR2F6 细胞核受体ERBA相关基因2抗体 | 人γ-谷氨酰环化转移酶(GGCT)核酸检测试剂盒 |
CG6856-PA 果蝇CG6856-PA抗体 | 猪凋亡相关因子(FAS/CD95)核酸检测试剂盒 |
膜粘连蛋白6抗体 | 小鼠基质金属蛋白酶1(MMP1)PCR检测试剂盒 |
MGLUR5 代谢型谷氨酸受体5B抗体 | 大鼠活化素B(ACV-B)核酸检测试剂盒 |
IQCK蛋白抗体 | 小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)核酸检测试剂盒 |
Blood Group Lewis a 血型Lewis A抗原抗体 | 大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)PCR检测试剂盒 |
离子通道蛋白Kv4.3抗体 | 人分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)PCR检测试剂盒 |
SUGT1 SUGT1蛋白抗体 | 大鼠载脂蛋白H(Apo-H)PCR检测试剂盒 |
剪切及多聚腺苷酸化特异性因子6蛋白抗体 | 人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)核酸检测试剂盒 |
大鼠补体片断3a(C3a)PCR检测试剂盒 | 五种致泻性大肠埃希菌核酸检测试剂盒小鼠脂肪酸合酶(FASN)PCR检测试剂盒 |
山羊还原型谷胱甘肽(GSH)核酸检测试剂盒 | 酵母核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒100T |
小鼠热休克因子1(HSF1)核酸检测试剂盒 | 大鼠热休克蛋白β2(HSPβ2)PCR检测试剂盒 |
检测性能优势:
高灵敏度
最低检出限达100-500拷贝/mL,显著高于传统培养法(需10-10 CFU/mL)。
强特异性
采用荧光探针法,避免与其他链球菌交叉反应,特异性≥99%。
二、临床应用价值
快速出结果
全程检测时间1-2小时(含核酸提取),较培养法(24-48小时)效率提升显著。
自动化兼容
支持批量样本处理,可搭配全自动核酸提取仪,适合大规模筛查。
三、操作便捷性
样本类型灵活
适用于阴道拭子、直肠拭子及尿液样本,采集后可直接检测。
操作简化
部分试剂盒采用一体化设计(如卡尤迪产品),减少人工操作步骤
关键字: 五种致泻性大肠埃希菌;检测试剂盒;
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