产品介绍:
轮状病毒 B 组(Group B Rotavirus, RV-B)核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测样本中B组轮状病毒核酸的分子诊断工具。B组轮状病毒(也称为成人腹泻轮状病毒)主要与成人腹泻暴发有关,该试剂盒利用实时荧光PCR或RT-PCR技术,能够快速、准确地判断腹泻是否由B组轮状病毒感染引起。
产品名称 | 轮状病毒 B 组核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3131 |
�� 试剂盒核心原理
该试剂盒主要基于实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术(TaqMan探针法)或逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术。
反转录(RT):由于轮状病毒是双链RNA病毒,首先需将提取的病毒RNA逆转录为cDNA。
特异性扩增:
荧光PCR法:针对B组轮状病毒的保守基因片段(如VP6基因或特异性RNA片段)设计特异性引物和探针。在扩增过程中,探针被水解,释放荧光信号(通常为FAM通道)。
RT-LAMP法:在恒温条件下(约63℃)进行扩增,通过观察反应液颜色变化(如加入SYBR Green I染料后变绿)或浊度变化来判断结果。
结果判定:荧光PCR法根据Ct值判定,RT-LAMP法根据肉眼观察颜色或电泳条带判定。
�� 典型产品参数
参数项 典型指标/说明
通用名称 B组轮状病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法/RT-LAMP法)
检测靶标 B组轮状病毒特异性保守基因序列(如VP6基因)
检测方法 一步法荧光RT-PCR / RT-LAMP
样本类型 粪便、肛拭子、呕吐物、病毒培养液等
灵敏度 荧光法:最低检测限可达 1×10³ 拷贝/mL;RT-LAMP法可达 3 拷贝/反应
特异性 仅特异性扩增B组轮状病毒,与A组轮状病毒、诺如病毒、细菌性腹泻病原体无交叉反应
储存条件 -20℃ 避光保存(部分酶制剂需避免反复冻融),有效期12个月
组成成分
PCR反应液/RT-LAMP Mix:含dNTPs、Mg²⁺、缓冲液、特异性引物和探针(或LAMP引物)。
酶混合物:含逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶(荧光法)或Bst DNA聚合酶(LAMP法)。
阳性对照:含有B组轮状病毒目的基因片段的质粒或灭活病毒(部分产品提供1×10⁸拷贝/μL的阳性对照)。
阴性对照:无核酸酶水或DEPC水。
核酸释放剂(部分附赠):用于快速裂解病毒释放RNA。
�� 结果判读标准(以荧光法为例)
阳性(+):
FAM通道出现典型的S型扩增曲线。
Ct值 ≤ 35-38(视具体说明书而定)。
结论:样本中检出B组轮状病毒核酸。
阴性(-):
无扩增曲线,或Ct值 > 38-40。
结论:样本中未检出B组轮状病毒核酸。
无效:
阳性对照未扩增,或阴性对照出现扩增,提示实验失败或存在污染,需重做。
⚠️ 注意事项与临床意义
临床意义:A组轮状病毒主要感染婴幼儿,而B组轮状病毒主要引起成人腹泻,常导致暴发流行。快速检测有助于疫情的快速溯源和控制。
样本采集:应在腹泻急性期(发病初期)采集粪便或肛拭子,此时病毒载量最高。样本若不能立即检测,应置于-20℃或-70℃保存。
生物安全:粪便样本具有传染性,操作时应在生物安全柜中进行,做好个人防护(BSL-2标准)。
技术选择:荧光PCR法灵敏度高、定量准确,适合临床确诊;RT-LAMP法操作简便、无需精密仪器,适合基层或现场快速筛查。
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检测性能优势:
高灵敏度
最低检出限达100-500拷贝/mL,显著高于传统培养法(需10-10 CFU/mL)。
强特异性
采用荧光探针法,避免与其他链球菌交叉反应,特异性≥99%。
二、临床应用价值
快速出结果
全程检测时间1-2小时(含核酸提取),较培养法(24-48小时)效率提升显著。
自动化兼容
支持批量样本处理,可搭配全自动核酸提取仪,适合大规模筛查。
三、操作便捷性
样本类型灵活
适用于阴道拭子、直肠拭子及尿液样本,采集后可直接检测。
操作简化
部分试剂盒采用一体化设计(如卡尤迪产品),减少人工操作步骤
关键字: 轮状病毒; B 组;检测试剂盒;
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