产品介绍：
札如病毒（Sapovirus, SaV）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测临床样本（如粪便、肛拭子）中札如病毒核酸的分子诊断工具。该试剂盒主要基于实时荧光RT-PCR（逆转录-聚合酶链式反应）技术，用于辅助诊断由札如病毒引起的急性胃肠炎。
产品名称 | 札如病毒核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3136 |
检测原理
由于札如病毒是单股正链RNA病毒，试剂盒通常采用一步法实时荧光RT-PCR（One-Step RT-qPCR）技术：
逆转录（RT）： 提取样本中的病毒RNA，在逆转录酶的作用下合成cDNA。
荧光PCR扩增： 针对札如病毒基因组的保守区域（通常是衣壳蛋白区（VP1）或RNA聚合酶区）设计特异性引物和TaqMan探针。
检测模式：
通用型检测： 针对所有能感染人的基因组（GI、GII、GIV、GV）设计引物，检测是否存在札如病毒感染。
有些高级试剂盒采用多重PCR技术，能在同一反应体系中区分不同基因型（如GI/GII/GIV使用FAM通道，GV使用VIC通道）。
�� 典型性能参数
参数指标 典型数值/范围 说明
检测目标 札如病毒 RNA 靶向衣壳蛋白或聚合酶保守区
检测方法 荧光RT-PCR法（探针法） 一步法操作，闭管防污染
检测限 1×10² ～ 1×10³ 拷贝/mL 灵敏度高，可检出低载量样本
特异性 高 不与诺如病毒、轮状病毒、星状病毒等交叉反应
检测时间 约 2 小时 包含核酸提取及扩增程序
储存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存 有效期通常为12个月
�� 样本类型
粪便样本（主要）： 患者急性期（发病3-5天内）的新鲜粪便或粪便悬液。
肛拭子： 用于婴幼儿或不便留取粪便的患者。
呕吐物样本： 在聚集性疫情调查中，患者的呕吐物也是重要的检测样本。
�� 操作流程简述
样本前处理： 取粪便样本加入PBS缓冲液或生理盐水，制成10%～20%的粪便悬液，离心取上清。
核酸提取： 使用病毒RNA提取试剂盒（通常为磁珠法或柱提法）提取样本中的总RNA。
配置反应体系： 将提取的RNA、PCR反应液（含引物、探针、酶混合物）按比例混合。
上机检测： 放入实时荧光PCR仪（如ABI 7500、QuantStudio等），设置好荧光通道（通常为FAM）和反应程序。
结果分析： 根据扩增曲线的Ct值（通常阈值设为35-40）判读阴阳性。
⚠️ 注意事项
临床意义： 札如病毒是引起人类急性胃肠炎的重要病原之一，尤其在婴幼儿和学龄前儿童中多见。症状与诺如病毒相似（呕吐、腹泻、腹痛），但通常症状较轻，病程较短（2-3天）。该试剂盒主要用于鉴别诊断，特别是在排除了轮状病毒和诺如病毒感染后的原因查找。
生物安全： 粪便样本含有大量微生物，操作应在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。
防污染： PCR检测极其灵敏，必须严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区），防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。
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注意事项：
1、严防污染
分区操作：必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样，避免气溶胶交叉污染。
专用耗材：使用无核酸酶的枪头、EP管等，建议使用带滤芯枪头。
规范操作：加样后立即盖紧管盖，避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理：样本采集后应立即冷藏（2-8℃），长期保存需置于-70℃以下，避免反复冻融。
试剂保存：严格按照说明书要求的温度（通常是-20℃或2-8℃）保存试剂，避免反复冻融。
对照设置：每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照，监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全：阳性样本需按生物安全三级标准处理，实验人员需佩戴个人防护装备（PPE）。
废弃物处理：所有废弃物（包括耗材、样本）需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
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