产品介绍:

艰难梭菌 tcdB 基因核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测粪便样本中艰难梭菌(Clostridioides difficile)毒素B基因(tcdB)的分子诊断产品。艰难梭菌是引起抗生素相关性腹泻和伪膜性肠炎的主要病原体,而 tcdB 基因是其关键的毒力基因。
产品名称 | 艰难梭菌 tcdB 基因核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3167 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
1. 检测原理

该试剂盒主要基于 实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR)。
靶标基因: tcdB(毒素B编码基因)。这是艰难梭菌致病性决定区(PaLoc)内的关键基因,编码细胞毒素B,是导致肠道细胞损伤的主要因子。
技术原理: 试剂盒通常采用 TaqMan探针法。针对 tcdB 基因的保守区域设计特异性引物和荧光标记的探针。
内参基因: 为了监控采样质量、核酸提取效率及是否存在PCR抑制物,试剂盒通常会设置内参基因(如人看家基因),与 tcdB 基因进行双重/多重荧光PCR扩增。
结果判读: 若样本中存在产毒型艰难梭菌,扩增曲线会呈现典型的“S”型,且 Ct 值小于设定的阈值(如Ct≤40);若无扩增或Ct值大于阈值,则判为阴性。
2. 产品特点

高特异性: 专门针对 tcdB 基因设计,能够特异性检测出产毒性艰难梭菌,区分非产毒株(非产毒株虽存在但不致病)。
高灵敏度: 最低检测限通常可达 10³ copies/mL 或 500 copies/μL,部分先进产品灵敏度更高,能够检出极低浓度的病原体。
快速高效: 整个检测过程(包括核酸提取和PCR扩增)通常在 2-3小时 内完成,远快于传统的细菌培养和毒素检测(需24-48小时)。
双重保障: 内参基因的设置可以有效避免因样本采集不当或抑制物存在导致的假阴性结果,提高检测的准确性。
3. 主要用途

临床诊断: 辅助诊断抗生素相关性腹泻(AAD)、伪膜性肠炎(PMC)及艰难梭菌感染(CDI)。适用于医院感染科、消化内科等科室。
医院感染监测: 用于医院内腹泻暴发流行的快速筛查和溯源,帮助制定感染控制措施。
流行病学研究: 用于监测艰难梭菌的流行株和变异情况。
4. 储存与使用注意事项

储存条件: 试剂盒通常需要 -20℃ 避光保存(部分组分如Buffer可能在2-8℃保存,具体需参照说明书),避免反复冻融,有效期通常为12个月。
样本要求: 通常使用新鲜的粪便样本或保存液保存的拭子样本。避免使用含钡剂或含铋剂的样本,以免干扰检测。
操作规范: 需在具备PCR检测资质的实验室进行,严格分区(试剂准备区、样本制备区、扩增区),防止气溶胶污染导致假阳性。
临床解读: 虽然PCR灵敏度高,但有时会检测出无症状携带者(即细菌存在但未致病),因此结果需结合患者的临床症状(如腹泻次数、白细胞计数等)由医生综合判断。
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主要应用:

转基因作物检测:快速筛查Bt棉花、Bt玉米等
食品/饲料监管:标识转基因成分是否符合法规(如中国GB 2760、欧盟EC 1829/2003)
环境监测:土壤或农产品中Bt基因残留分析
操作流程
样本处理:研磨植物组织或均质化食品样本
DNA提取:推荐CTAB法或商业化提取试剂盒
PCR扩增:
反应体系:20 μL(含15 μL反应液+5 μL DNA模板)
扩增程序:95℃ 2min → (95℃ 15s → 60℃ 30s)×40循环
关键字: 艰难梭菌; tcdB 基因;检测试剂盒;
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