产品介绍:

猪带绦虫是引起猪带绦虫病(成虫寄生)和囊尾蚴病(幼虫寄生)的病原体,其中囊尾蚴病(尤其是脑囊虫病)是危害最严重的人畜共患病之一。传统的显微镜检查和免疫学方法在虫种鉴别和早期诊断上存在局限,而核酸检测(PCR)技术具有高特异性和高敏感性,能够精准区分猪带绦虫与牛带绦虫,并能检测出微量感染。
产品名称 | 猪带绦虫核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3261 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
1. 检测原理与技术

该试剂盒主要基于聚合酶链式反应(PCR)技术,常见形式包括实时荧光定量PCR(qPCR)或常规PCR。
核心机制:
DNA提取:从粪便、血液、脑脊液或组织样本中提取寄生虫的基因组DNA。
特异性扩增:针对猪带绦虫基因组中高度保守且具有种特异性的区域设计引物。
常见靶标:线粒体基因(如cox1、nad1)、核糖体基因(如ITS1/ITS2)、TS1序列或pTsol-9/pTsag-16等种特异性DNA片段。
检测:通过扩增产物的有无及大小来判断样本中是否含有猪带绦虫核酸。
技术优势:能够将猪带绦虫与形态相似的牛带绦虫、亚洲带绦虫等明确区分开,解决了传统“虫卵查见但无法定种”的难题。
2. 试剂盒特点与性能

这类试剂盒专为寄生虫病精准诊断设计,具有以下显著特点:
性能维度 描述
特异性 极高。引物和探针专门针对猪带绦虫设计,通常不会与牛带绦虫、水泡绦虫、细粒棘球绦虫等其他绦虫发生交叉反应。
灵敏度 极高。最低检测限可达到单个虫卵或极低浓度的DNA(如10 copies/μL),显著高于粪便涂片法。
鉴别能力 能够精准区分猪带绦虫和牛带绦虫,这对于流行病学调查和临床治疗(特别是囊尾蚴病风险评估)至关重要。
检测样本 多样化。适用于粪便(查成虫)、血液、脑脊液(查囊尾蚴)、组织样本及环境样本(如节片)。
3. 适用样本与临床意义

适用样本:
粪便:用于诊断肠道成虫感染,检测虫卵或节片脱落的DNA。
血液/脑脊液:用于辅助诊断囊尾蚴病(特别是脑囊虫病),检测循环中的游离绦虫DNA。
组织/节片:对排出的节片或手术摘除的组织进行虫种鉴定。
临床意义:
确诊依据:对于粪便查卵阴性但临床疑似(如有食“米猪肉”史、排节片史)的患者,提供确诊依据。
脑囊虫病辅助诊断:在影像学(CT/MRI)发现可疑病灶但抗体检测阴性时,核酸检测可提供直接病原学证据。
疗效考核:治疗后通过检测DNA载量变化评估杀虫效果。
主要用途:目前市面上的此类试剂盒多用于科研(RUO)、疾控中心(CDC)监测及动物检疫。虽然已有成熟的PCR检测方法,但作为注册医疗器械进入临床常规检验的商业化试剂盒相对较少,部分三甲医院的中心实验室或寄生虫病研究所会使用自建方法(LDT)进行检测。
操作注意事项

样本前处理:
粪便样本需经过饱和盐水漂浮或沉淀法浓集虫卵,以提高检出率。
脑脊液样本需注意防止基因组DNA酶降解。
防污染:PCR检测极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。
结果解读:核酸检测结果需结合患者的流行病学史(如是否去过流行区、是否有食生肉史)、临床症状及其他检查结果(如影像学、抗体检测)综合判断。阳性结果表明存在现症感染或近期感染。
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操作步骤:

整个流程遵循“样本处理 → 试剂配制 → 加样 → 上机检测 → 结果分析”的逻辑,核心是防污染和精准操作。
1. 样本处理 (核酸提取)
样本:鼻咽拭子、咽拭子或痰液样本。
裂解:将拭子浸入裂解液,充分混匀后室温静置10分钟。
提取:采用磁珠法或离心柱法提取总RNA,严格按照试剂盒说明书操作。
保存:洗脱后的RNA应立即使用或分装保存于-80℃。
2. 试剂配制与加样
反应体系准备:在试剂准备区配制Master Mix。根据待检测样本数计算总体积,通常按样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照的原则来配制。
推荐体系:例如,使用20μL体系的试剂盒,可包含qPCR预混液16μL、引物探针混合液4μL(具体体积请以实际说明书为准)。
分装:将配好的反应体系分装至PCR反应管中(如20μL/管)。
加样:在样本处理区,分别向反应管中加入5μL的模板RNA(样本、阳性质控、阴性质控)。盖紧管盖,短暂离心,避免污染和气泡。
3. 上机检测
运行程序:将反应管放入荧光定量PCR仪,运行预设程序。典型程序包括:
逆转录:50℃,15分钟(将RNA逆转录为cDNA)。
预变性:95℃,10分钟(激活Hot-Start Taq酶)。
扩增循环:通常为40个循环,每个循环包括变性(95℃,15秒) 和 退火/延伸(60℃,45秒),仪器在退火/延伸步骤同时采集荧光信号。
信号监测:仪器实时监测荧光信号变化,生成扩增曲线。
4. 结果分析与判定
Ct值:仪器根据荧光曲线自动计算阈值循环数(Ct值)。
结果判定:
阳性:样本Ct值 ≤ 37(具体阈值请以试剂盒说明书为准),且扩增曲线呈典型"S"型。
阴性:样本无Ct值或Ct值 > 40。
无效:阳性对照无Ct值或Ct值 > 35,或阴性对照有Ct值,需重新检测。
关键字: 猪带绦虫;核酸检测试剂盒;
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