棒杆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 棒杆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Corynebacterium spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4505 |
产品概述
本试剂盒采用SYBR Green I 荧光染料法，通过特异性引物扩增棒杆菌属（Corynebacterium）保守基因区域（如16S rRNA或rpoB基因），实现对样本中棒杆菌的快速、高灵敏度定量检测。适用于临床病原体筛查、食品安全检测、环境微生物监测等领域。
检测原理
染料结合：SYBR Green I 嵌入双链DNA后发射荧光信号，强度与PCR产物量成正比。
实时监测：每轮PCR循环采集荧光值，生成扩增曲线，通过Ct值（阈值循环数）定量初始模板浓度。
熔解曲线分析：扩增结束后升温解链，验证产物特异性（单一峰形为特异性扩增）。
试剂盒组成
| 组分 | 体积/数量 | 保存条件 |
| 2× SYBR Green qPCR Master Mix | 1 mL × 1管 | -20℃避光 |
| 棒杆菌通用引物混合液（F+R） | 100 μL × 1管 | -20℃ |
| 阳性对照（C. diphtheriae DNA） | 50 μL × 1管 | -20℃ |
| 阴性对照（无核酸水） | 1 mL × 1管 | -20℃ |
| RNase-Free ddH₂O | 1 mL × 1管 | 室温 |
技术参数
检测靶标：棒杆菌属通用保守基因（提供引物序列号：Cory-Uni-F/R，需保密可询）
灵敏度：≥10 copies/μL
线性范围：10² ~ 10⁸ copies/μL（R² > 0.99）
特异性：不交叉反应于葡萄球菌、链球菌等常见革兰氏阳性菌
重复性：CV < 5%（批内/批间）
操作流程
1. 样本制备
提取待测样本（痰液、血液、食品匀浆等）DNA，推荐使用柱式基因组DNA提取试剂盒。
2. PCR反应体系配制（20 μL体系）
| 组分 | 体积 |
| 2× SYBR Green Master Mix | 10 μL |
| 棒杆菌引物混合液 | 1 μL |
| DNA模板 | 2 μL |
| ddH₂O | 7 μL |
注：每样本设3复孔，阳性/阴性对照同步运行。
3. qPCR程序设置
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 采集模式 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 | - |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 | SYBR通道 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | | |
| 熔解曲线 | 65℃ → 95℃ | 每0.5℃升/5 sec | 1 | 连续采集 |
数据分析
阈值设定：取指数扩增期荧光信号上升拐点（建议仪器自动计算）。
定量方法：
绝对定量：使用标准品（需另购）绘制标准曲线（Ct值 vs log拷贝数）。
相对定量：以内参基因（如GAPDH）校正样本间差异。
特异性验证：熔解曲线单一峰（Tm值：85±1℃），杂峰提示引物二聚体或非特异扩增。
注意事项
避免污染：分区操作（试剂准备区→样本处理区→扩增区），使用带滤芯枪头。
试剂稳定性：解冻后Master Mix需涡旋混匀，避免反复冻融（≤3次）。
引物特异性：新样本类型建议测序验证扩增产物。
生物安全：阳性对照含灭活DNA，仍须按Ⅱ类病原体处理废弃物。
预期用途
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。可检测包括：
致病性棒杆菌：C. diphtheriae（白喉杆菌）、C. ulcerans
条件致病菌：C. jeikeium、C. striatum
公司正在出售的产品
畸形细颈线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体ELISA试剂盒 |
匙状细颈毛样线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 突触蛋白Ⅰ检测试剂盒 SYN1 ELISA Kit |
新星诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 突触囊泡蛋白ⅩⅤ检测试剂盒 SYT15 ELISA Kit |
马苏哈鱼病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 停靠蛋白4检测试剂盒 DOK4 ELISA Kit |
波氏奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 酮戊二酸脱氢酶检测试剂盒 OGDH ELISA Kit |
孟氏尖旋线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 四旋蛋白3检测试剂盒 TSPAN3 ELISA Kit |
巴斯德氏杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 糖基化依赖性细胞黏附分子检测试剂盒 GlyCAM1 ELISA Kit |
产紫青霉探针法荧光定量PCR试剂盒 | 碳酸酐酶Ⅵ检测试剂盒 CA6 ELISA Kit |
美人鱼发光杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 透明质酸氨基葡糖苷酶3检测试剂盒 HYAL3 ELISA Kit |
邻单胞菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 突触囊泡蛋白ⅩⅦ检测试剂盒 SYT17 ELISA Kit |
猪巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1检测试剂盒 GPLD1 ELISA Kit |
棒杆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒丙酸杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 停靠蛋白1检测试剂盒 DOK1 ELISA Kit |
雷氏普罗威登斯菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 停靠蛋白2检测试剂盒 DOK2 ELISA Kit |
痒螨通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 细胞周期素B3检测试剂盒 CCNB3 ELISA Kit |
蛙病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 无翅型MMTV整合位点家族成员5B检测试剂盒 WNT5B ELISA Kit |
关键字： 棒杆菌通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。
派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！