产品用途
科研用途，适用于轮状病毒核酸的定性及定量检测，严禁用于临床诊断。
产品名称 | 轮状病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Rotavirus Universal Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4363 |
产品特点
即开即用：优化预混体系，用户仅需提供病毒RNA样本。
高特异性：针对轮状病毒通用保守序列设计引物，避免交叉反应。
高灵敏度：检测下限为数百拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。
防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。
包装成分
| 成分编号 | 组分名称 | 规格 | 包装颜色 |
| 2×qPCR MagicMix（预混液） | 500μL/管 | 棕色管 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |
| 轮状病毒通用PCR引物混合物 | 100μL | 白盖 |
| 阳性对照（1×10^8 拷贝/μL） | 50μL | 红盖 |
实验操作指南
1. 样本准备
建议设置对照：
阳性对照（PC）：使用试剂盒提供的阳性对照（稀释至与样本体积一致）。
阴性对照（NC）：以无核酸酶水替代样本。
每批次需设置N+2个提取反应（N为样本数，额外增加PC和NC）。
2. RNA提取
兼容多数商业化RNA提取试剂盒，建议使用柱式法或磁珠法纯化。
3. 荧光定量PCR反应
反应体系（20μL）：
2×qPCR MagicMix：10μL
引物混合物：1μL
模板RNA：2μL
无核酸酶水：补至20μL
扩增程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 50℃ | 15 min | 1 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 10 sec | 40 |
| | 60℃ | 30 sec | |
4. 结果分析
预期产物长度：约200 bp（可通过1.5%-2.0%琼脂糖凝胶电泳验证）。
有效性判定：若阴性对照出现扩增，表明污染，实验需重复。
注意事项
所有操作需在无核酸污染环境下进行，建议使用紫外线灭菌工作台。
阳性对照需单独存放，避免反复冻融（建议分装保存）。
本试剂盒检测结果需结合临床症状及其他实验室指标综合判断。
存储条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
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