牛轮状病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 牛轮状病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Bovine Rotavirus Universal Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3426 |
产品概述
本试剂盒专为牛轮状病毒(Bovine Rotavirus)的通用检测设计,采用染料法荧光定量RT-PCR技术,适用于科研领域对病毒核酸的定性和定量分析。产品具有高灵敏度、高特异性及操作简便等特点,检测下限可达数百拷贝/反应。
产品特点
即开即用:用户仅需提供病毒样本,无需额外优化反应体系。
高特异性:基于牛轮状病毒保守序列设计引物,避免与其他病毒交叉反应。
宽线性范围:定量检测时线性范围覆盖至少5个数量级。
一管式检测:减少开盖操作,降低污染风险。
兼容性:与常见病毒核酸提取试剂盒兼容。
包装规格
规格:50次20μL反应体系
主要成分:
2×qPCR预混液(含荧光染料)
专用模板稀释液
牛轮状病毒通用引物混合物
阳性对照(1×10^8 拷贝/μL)
实验流程
1. 样本准备
样本数量:若检测N个样本,需设置N+2个提取反应(含1个阳性对照和1个阴性对照)。
阳性对照:使用试剂盒提供的阳性对照(1×10^6 拷贝/μL)稀释至与样本体积一致。
阴性对照:以无菌水替代样本。
核酸提取:建议使用商业DNA/RNA提取试剂盒纯化样本。
2. PCR扩增
按说明书配制反应体系(20μL/反应),加入模板后进行荧光定量PCR。
推荐循环条件:
逆转录:50°C 15分钟
预变性:95°C 5分钟
扩增:95°C 15秒 → 60°C 1分钟(40循环)
3. 结果分析
定性检测:通过扩增曲线和Ct值判定阳性/阴性。
定量检测:根据标准曲线计算病毒拷贝数。
电泳验证(可选):取5-10μL产物进行1.5%-2%琼脂糖凝胶电泳,预期条带约200bp。
注意事项
质量控制:若阴性对照出现扩增,表明存在污染,实验需重新进行。
用途限制:仅限科研使用,不可用于临床诊断。
储存条件:-20°C避光保存,避免反复冻融。
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