副溶血性弧菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Vibrio parahaemolyticus Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4522
检验原理
采用SYBR Green I荧光染料法，针对副溶血性弧菌保守基因序列设计特异性引物，通过实时监测PCR扩增过程中的荧光信号，实现对靶标核酸的定性和定量分析。扩增曲线与Ct值用于判断样本中病原体的存在及浓度。
试剂组成
预混PCR Master Mix：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及SYBR Green I染料（红盖装，1 mL）。
阴性/阳性对照：阴性对照为无核酸酶水，阳性对照为副溶血性弧菌标准DNA模板。
超纯水（亮黄色盖，1 mL）。
注：具体组分可能因批次调整，以实际包装清单为准。
操作步骤
样本处理：提取待测样本DNA（需自备提取试剂）。
反应体系配制：按比例混合Master Mix、引物、模板DNA及超纯水。
上机检测：按以下程序运行：
预变性：95℃ 2分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）
数据分析：
定性：Ct值≤35为阳性，≥40为阴性；35<Ct<40需复测。
定量：通过标准曲线计算模板拷贝数。
性能参数
灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应。
特异性：引物经优化，与近源菌株无交叉反应。
重复性：批内/批间变异系数≤5%。
运输与保存
运输条件：低温冰袋运输。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
注意事项
本试剂盒仅限科研使用。
避免反复冻融，分装后使用。
实验需在无菌环境下操作，防止污染。
质量控制
每批次试剂均通过阳性对照验证，确保扩增效率≥90%。
阴性对照Ct值应≥40，阳性对照Ct值≤30且呈现典型S型扩增曲线。
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