拟态弧菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Vibrio mimicus Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4523
产品用途
专用于拟态弧菌(Vibrio mimicus)的定性或定量检测,适用于环境、食品或临床研究样本(非临床诊断用途)。
试剂盒特点
高特异性:基于拟态弧菌保守序列设计引物,避免交叉反应。
灵敏度:检测限可达几百拷贝/反应。
便捷性:预混荧光染料(如SYBR Green),即开即用,仅需提供模板DNA。
防污染设计:一管式闭管检测,减少气溶胶污染风险。
检测原理
荧光染料特性:游离状态下吸收峰471 nm,结合DNA后吸收峰500 nm,发射峰530 nm。信号采集建议在复性或延伸阶段进行。
定量分析:通过标准曲线(阳性对照log浓度 vs. Ct值)推算样本浓度。
定性判读:
阳性:Ct值≤35,且扩增曲线典型;
阴性:Ct值≥40;
灰区:35<Ct<40需复测,复测Ct<40判为阳性。
操作步骤
反应体系配制:按说明书比例混合PCR预混液、引物、模板DNA及ddH₂O。
上机参数:
预变性:95℃ 2分钟;
循环:95℃ 15秒→60℃ 30秒(采集荧光),共40循环;
仪器参数需根据机型优化。
数据分析:
定量:通过标准曲线计算样本浓度;
定性:依据Ct值及扩增曲线判读。
质量控制
阴性对照:Ct值应≥40;
阳性对照:Ct值≤30,且显示典型扩增曲线。
注意事项
避免反复冻融试剂,分装保存。
操作需在无菌环境下进行,防止污染。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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