坎氏弧菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 坎氏弧菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Vibrio campbellii Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4529 |
产品概述
本试剂盒专为坎氏弧菌(Vibrio campbellii)的快速、高灵敏度检测设计,采用染料法荧光定量PCR技术,适用于科研用途(不可用于临床诊断)。试剂盒包含预混反应体系、特异性引物及阳性对照,可实现即开即用,避免交叉污染。
产品特点
高特异性:基于坎氏弧菌保守序列设计引物,与相近病原体无交叉反应。
高灵敏度:检测下限达几百拷贝/反应。
便捷性:一管式预混体系(20μL/反应),减少操作步骤。
稳定性:-20℃避光保存,有效期6个月至1年(不同略有差异)。
规格与成分
试剂一:2×qPCR MagicMix(500 μL,棕色管)
试剂二:荧光PCR专用模板稀释液(1 mL,黄盖)
试剂三:坎氏弧菌染料法PCR引物混合液(100 μL,白盖)
试剂四:阳性对照(需单独添加,具体规格见包装标注)
实验流程
样本处理:提取待测样本DNA,按说明书稀释至合适浓度。
反应体系配制:按20μL/反应混合各试剂,加入模板DNA。
PCR扩增:按以下程序运行:
预变性:95℃ 5分钟
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(采集荧光信号)
数据分析:
定量检测:以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,推算样本浓度。
定性检测:
阴性对照Ct值≥40;阳性对照Ct值≤30且扩增曲线典型。
样本判定:Ct≤35为阳性;Ct≥40为阴性;35<Ct<40需复测。
注意事项
避免反复冻融试剂,操作时需佩戴防护用具。
不同机型可能需要自备10×ROX校正染料。
阳性对照需最后添加,防止污染。
运输与保存
低温运输(-20℃),保存于-20℃避光环境。
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