哈维氏弧菌染料法荧光定量PCR试剂盒

哈维氏弧菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

高特异性：引物针对哈维氏弧菌保守基因设计，与其他弧菌（如副溶血性弧菌）无交叉反应。

灵敏度：最低检测限达10² CFU/mL，适用于早期感染或污染筛查。

快速检测：40分钟内完成扩增（探针法），常规PCR约1.5小时。

抗干扰性：优化DNA聚合酶，耐受样本中常见抑制物。

便捷性：预混试剂（含Taq酶、dNTPs、染料等），用户仅需提供DNA模板。

试剂盒组成

核心组分：

2×PCR预混液（含荧光染料）

哈维氏弧菌特异性引物混合液

阳性对照（目标基因片段，1×10⁸拷贝/μL）

超纯水（阴性对照）

辅助耗材：PCR管、说明书。

操作步骤

1. 样本DNA提取

使用配套或通用DNA提取试剂盒处理样本（如水体、组织）。

2. 反应体系配置（以20μL为例）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×PCR预混液 | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板/对照 | 2 |

| 超纯水 | 6 |

3. PCR扩增程序

预变性：95℃, 5 min

循环阶段（35次）：

变性：95℃, 30 sec

退火：55℃, 30 sec

延伸：72℃, 40 sec

最终延伸：72℃, 7 min

4. 结果分析

荧光定量PCR：直接读取扩增曲线及Ct值。

电泳检测（可选）：阳性样本显示特异性条带（如551bp）。

质量控制

阳性对照：必须出现目标扩增。

阴性对照：无扩增信号。

注意事项

防污染：严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用专用耗材。

试剂保存：-20℃避光保存，避免反复冻融。

样本处理：避免交叉污染，建议设置重复检测。

应用范围

水产养殖：对虾发光病病原检测。

食品安全：食品（如海鲜、禽肉）中哈维氏弧菌污染筛查。

科研领域：微生物分子生物学研究。

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