鮰爱德华氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Edwardsiella ictaluri Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4534
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green I荧光染料法,通过设计特异性引物靶向鮰爱德华氏菌基因保守区域,在实时荧光定量PCR仪中检测核酸扩增信号。扩增过程中释放的荧光强度与模板量成正比,实现定性和定量分析。
试剂组成
鮰爱德华氏菌扩增液:50μL ×1管
鮰爱德华氏菌反应液:950μL ×1管
阳性质控品(含靶基因片段):50μL ×1管
阴性质控品(无核酸模板):50μL ×1管
说明书:1份
注意事项:
不同批号组分不可混用。
试剂盒内组分可满足标称检测次数。
储存条件及有效期
储存:-20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(≤7次)。
有效期:12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪,包括:
ABI系列(如7500、StepOnePlus)
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf Mastercycler ep realplex
需自备耗材:
无核酸酶的离心管(1.5mL、0.2mL PCR管)、滤芯吸头(10μL/200μL/1000μL)、离心机、移液器等。
样品要求
样本类型:胃液分泌物、培养物等(参考《临床微生物样本采集规范》)。
保存条件:
短期:-20℃;
长期:-70℃以下(≤6个月);
运输:2~8℃冰袋,避免反复冻融。
使用方法
样本处理(样本处理区):
按规范提取DNA,避免交叉污染。
PCR反应体系配制(试剂准备区):
按说明书比例混合反应液、扩增液及模板DNA。
上机检测(扩增区):
设置程序:预变性(95℃, 2min)→循环扩增(95℃ 15s, 60℃ 30s, 40次)。
结果分析:
根据扩增曲线和Ct值判定样本阴阳性。
性能参数
灵敏度:可检测低至几百拷贝/反应。
特异性:与相近病原体无交叉反应。
注意事项
实验分区操作,避免气溶胶污染。
阴/阳性质控品需同步检测以验证体系有效性。
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