产品用途
用于科研领域猪星状病毒的定性及定量检测，不可用于临床诊断。
产品名称 | 猪星状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Porcine Astrovirus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4381 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供RNA模板，试剂盒包含预混优化组分，无需额外配制。
高灵敏度与特异性：引物针对猪星状病毒高度保守区设计，避免与其他病毒核酸交叉反应。
双重检测功能：支持定性（判定阳性/阴性）和定量分析（线性范围≥5个数量级）。
内控设计：提供无传染性的DNA片段作为阳性对照，避免假阴性干扰。
闭管操作：降低气溶胶污染风险，适配20μL反应体系，单盒可完成50次检测。
操作流程
样本制备（需在独立样本区操作）
RNA提取：使用兼容性核酸提取试剂盒提取样本RNA，建议采用带芯枪头避免污染。
标准曲线制备（定量检测需执行）：
标记6管为2–7号，每管加入45 μL荧光PCR专用稀释液。
7号管加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀得1×10^7拷贝/μL标准品，依次10倍稀释至2号管（1×10^2拷贝/μL）。
PCR反应体系配制（建议冰上操作）
每20μL反应体系包含：
2×qPCR Magic Mix（预混酶与dNTPs）
染料法引物混合液
模板RNA或标准品5 μL
荧光定量PCR程序
逆转录：50°C 10分钟（若需cDNA合成）。
预变性：95°C 3分钟。
循环阶段（40 cycles）：95°C 15秒 → 60°C 30秒（采集荧光信号）。
注意事项
分区操作：标准品稀释与样本处理需严格分区分时，避免交叉污染。
质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板对照）及阳性对照。
保存条件：组分-20°C避光保存，避免反复冻融。
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关键字： 猪星状病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;