产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专为热带利什曼原虫（Leishmania tropica）的检测设计，适用于科研领域。试剂盒具有高灵敏度和特异性，可进行定性和定量分析，检测限可达数百拷贝/反应。
产品名称 | 热带利什曼原虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Leishmania tropica Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4406 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品DNA模板。
高特异性：引物针对热带利什曼原虫保守序列设计，避免交叉反应。
一管式检测：减少操作步骤，降低污染风险。
双功能应用：支持定性和定量检测，定量线性范围覆盖5个数量级。
配套齐全：包含阳性对照、阴性对照及专用稀释液，确保结果可靠性。
组分与规格
2×qPCR MagicMix（棕色管，500 μL）
荧光PCR专用模板稀释液（黄盖，1 mL）
热带利什曼原虫PCR引物混合物（白盖，100 μL）
阳性对照（1×10^8 拷贝/μL，红盖，50 μL）
阴性对照（DEPC-H2O）
注：50次反应体系（20 μL/次）。
样本要求
采集与保存：样本需低温运输（-20℃），保存期限1年，避免反复冻融。
DNA提取：推荐使用兼容性核酸提取试剂盒，确保纯度（OD260/280≈1.8-2.0）。
操作步骤
1. 标准曲线制备（定量检测适用）
将阳性对照按10倍梯度稀释（1×10^8至1×10^3拷贝/μL），分别标记为7至2号管。
每稀释步骤更换枪头，涡旋混匀后冰上保存。
2. 反应体系配制
每20 μL反应体系包含：
10 μL 2×qPCR MagicMix
2 μL 引物混合物
2 μL 模板DNA（待测样品/对照）
6 μL DEPC-H2O
3. 扩增程序
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
结果判读
定性检测：
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。
阴性：Ct值≥40。
可疑（35<Ct<40）：需重复检测，若Ct仍<40判为阳性。
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算待测样本浓度。
注意事项
实验分区操作（样本制备区、试剂配制区、扩增区），避免污染。
阳性对照需单独存放，防止交叉污染。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
运输与储存
运输：泡沫箱加冰密封（-20℃）。
储存：-20℃避光保存，有效期12个月。
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