利什曼原虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对利什曼原虫属（Leishmania spp.）基因组高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量检测，灵敏度高，特异性强。

试剂组成

| 组分名称 | 规格 |

| 预混PCR反应液（含SYBR Green） | 1 mL × 1管 |

| 利什曼原虫通用引物混合液 | 100 μL × 1管 |

| 阳性质控品（1×10^8 copies/μL） | 50 μL × 1管 |

| 阴性质控品（DEPC-H2O） | 50 μL × 1管 |

| 说明书 | 1份 |

注意：不同批号组分不可混用，试剂盒内组分可满足标称检测次数。

储存条件及有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（建议分装，冻融≤7次）。

运输：低温干冰或冰袋（2~8℃）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500/QuantStudio系列

Bio-Rad CFX系列

Roche LightCycler系列

Eppendorf Mastercycler ep realplex

自备耗材：无核酸酶离心管（0.2 mL PCR管、1.5 mL EP管）、滤芯吸头（10/200/1000 μL）、离心机、移液器等。

样本要求

样本类型：组织、血液、培养物等，具体采集方法需参照《临床微生物样本采集规范》。

保存：短期-20℃保存，长期-70℃保存（避免反复冻融）；运输需使用2~8℃冰袋。

使用方法

1. DNA提取

使用商业化核酸提取试剂盒或自选方法纯化样本DNA，确保无抑制剂残留。

2. 试剂配制（试剂准备区）

每反应体系20μL：

预混PCR反应液 10 μL

引物混合液 2 μL

模板DNA 2 μL

超纯水 6 μL

3. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |

| 熔解曲线分析 | 60~95℃ | — | 1 |

4. 结果分析

定性：Ct值≤35且熔解曲线峰值单一判为阳性。

定量：通过标准曲线（10^2~10^7 copies/μL）计算拷贝数。

注意事项

实验需分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区），避免交叉污染。

阳性质控品需单独存放，防止污染其他组分。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

公司正在出售的产品