预期用途
本试剂盒用于体外定性或定量检测临床样本（如血清、血浆或组织）中的克里米亚-刚果出血热病毒RNA，适用于病原学诊断及流行病学监测。
产品名称 | 克里米亚-刚果出血热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Crimean-Congo Hemorrhagic Fever Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4450 |
检验原理
采用染料法荧光定量RT-PCR技术，通过特异性引物和荧光染料（如SYBR Green）对CCHFV RNA靶标进行扩增检测。实时监测荧光信号，通过Ct值判定病毒载量。
试剂组成
酶混合液：50μL×1管（含逆转录酶、热启动DNA聚合酶等）
CCHFV反应液：500μL×2管（含预混引物、dNTPs、缓冲液等）
阳性质控品（20×10^7拷贝/mL）：50μL×1管
阴性质控品：250μL×1管
说明：不同批号试剂禁止混用。
操作步骤
样本处理：按规范提取RNA，避免降解。
反应体系配制：每20μL反应体系含10μL反应液、2μL酶液、2μL模板RNA及6μL无核酸酶水。
PCR程序设置：
逆转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 2分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）
结果分析
阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈典型指数增长。
可疑：35＜Ct值≤38，需重复检测；若重复结果仍在此范围且曲线正常，判为阳性。
阴性：无扩增曲线或Ct值＞38。
注意事项
严格分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。
试剂使用前需完全融化并短暂离心，避光保存反应液。
实验废弃物按《病原微生物实验室生物安全管理条例》处理，使用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面。
本试剂仅限专业人员使用，检测结果需结合临床表现及其他指标综合判断。
储存及有效期
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期：12个月。
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关键字： 克里米亚-刚果出血热病毒;染料法荧光定量;RT-PCR试剂盒;