检验原理

本试剂盒基于实时荧光定量RT-PCR技术,针对甲型流感病毒M1亚型的保守基因区域(如基质蛋白M1基因)设计特异性引物和荧光染料(如SYBR Green)。通过逆转录将病毒RNA转化为cDNA,随后进行PCR扩增,实时监测荧光信号变化,实现对病毒核酸的定性或定量检测。
产品名称 | 甲型流感病毒M1亚型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Influenza A Virus M1 Subtype Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4493 |

试剂组成

反应液:含缓冲液、dNTPs、逆转录酶等,支持RNA逆转录和PCR扩增(500μL/管,25T规格为1管,50T规格为2管)。
酶液:含高保真DNA聚合酶(25μL/管,25T规格;50μL/管,50T规格)。
阳性质控品:含M1亚型靶序列的RNA(250μL/管)。
阴性质控品:无核酸酶水(250μL/管)。
注:不同批号组分不可混用。
储存条件及有效期
-20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(建议不超过5次),有效期12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪,包括但不限于:
ABI 7500
安捷伦 MX3000P/3005P
LightCycler系列
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf RealPlex
检测流程

样本采集:鼻咽拭子、咽拭子或呼吸道分泌物,需低温保存或立即处理。
RNA提取:推荐使用磁珠法或离心柱法提取病毒RNA。
逆转录与扩增:
将RNA模板与反应液、酶液混合,按以下程序运行:
逆转录:50℃ 15分钟
预变性:95℃ 2分钟
扩增:95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(40个循环,荧光采集)。
结果分析:根据扩增曲线和Ct值判定样本阳性/阴性,定量需使用标准品绘制标准曲线。
性能参数

灵敏度:可检测低至10拷贝/μL的病毒RNA。
特异性:不与甲型流感其他亚型(如N6)或常见呼吸道病原体交叉反应。
线性范围:定量检测覆盖10^1~10^6拷贝/μL。
注意事项

实验需在PCR洁净环境下操作,避免气溶胶污染。
阴阳性质控品需与样本同步检测,以监控试剂有效性。
本产品仅限科研使用,临床诊断需经进一步验证。
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关键字: 甲型流感病毒M1亚型;染料法荧光定量;PCR试剂盒;