预期用途
本试剂盒适用于临床咽拭子、肛拭子、血清、组织渗出液等样本中甲型流感病毒(包括H1、H3等亚型)RNA的定性检测。检测结果需结合临床症状及其他实验室指标综合判断,不可作为唯一诊断依据。
产品名称
甲型流感(禽流感)病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
英文名称
Avian Influenza Virus Universal Dye-based qRT-PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4498
检测原理
采用实时荧光定量RT-PCR技术,通过特异性引物和荧光染料(如SYBR Green)靶向扩增甲型流感病毒保守基因片段(如M基因或NP基因)。扩增过程中,荧光信号与产物量成正比,通过实时监测荧光强度实现定量分析。
主要组成
RT-PCR反应液:含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs及缓冲成分。
甲型流感病毒通用引物混合液:针对病毒保守区域设计。
阳性对照:灭活甲型流感病毒RNA。
阴性对照:无核酸酶水。
内标对照(可选):用于监测提取及扩增效率。
操作步骤
样本处理:按规范提取样本RNA,建议使用配套核酸提取试剂。
反应体系配制:将反应液、引物混合液与模板RNA混合,离心后分装至PCR管。
扩增程序:
逆转录:50℃ 15分钟
预变性:95℃ 3分钟
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)
结果判读:
阳性:Ct值≤35,且扩增曲线呈典型S型。
阴性:无扩增曲线或Ct值>40。
可疑:Ct值35-40,建议复测或结合临床评估。
注意事项
实验需在符合生物安全等级的实验室进行。
避免反复冻融试剂,分装后-20℃保存。
批号不同的组分不可混用。
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