磷酸化Rho相关蛋白激酶1抗体
原理特点
磷酸化ROCK1是RhoA下游核心活化激酶，介导肌动蛋白骨架重塑、细胞收缩、迁移与凋亡调控。该抗体特异性识别ROCK1磷酸化活化位点，精准检测通路活化水平；同时可抑制激酶活性，阻断细胞骨架重构，抑制细胞迁移、侵袭与异常收缩。
英文名称:phospho-ROCK1 (Thr455+Ser456) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化Rho相关蛋白激酶1抗体
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:p-ROCK1(Thr455/Ser456); p160 ROCK1; p160ROCK; Renal carcinoma antigen NY REN 35; Rho associated coiled coil containing protein kinase 1; Rho associated protein kinase 1; Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1; ROCK1_HUMAN.
交叉反应:Human,Mouse
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human ROCK1 around the phosphorylation site of Thr455+Ser456
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量：158 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：ROCK1 是 RhoA 核心下游激酶，磷酸化激活后磷酸化肌球蛋白轻链，介导平滑肌收缩、细胞骨架重塑、细胞凋亡与肿瘤侵袭转移。
抗体原理：针对 ROCK1 活化关键磷酸化位点合成磷酸肽免疫，仅识别激酶活化构象，不结合静息未磷酸化 ROCK1 蛋白。
产品特点：直接反映 Rho/ROCK 通路激活程度，常用于纤维化疾病、动脉粥样硬化、肿瘤浸润、青光眼小梁收缩机制检测，多平台兼容 WB、免疫荧光。
实验操作关键
样本前处理
细胞样本：用PBS缓冲液轻洗2-3次去除培养基残留，固定（如4%多聚甲醛）后按需进行通透处理（0.3% Triton X-100），封闭液（5% BSA或血清）孵育30-60分钟以降低非特异性结合。
组织样本：石蜡切片需先脱蜡水化，根据抗体类型选择合适的抗原修复方法（如柠檬酸盐缓冲液热修复）；新鲜组织需尽快固定或冷冻保存。
抗体孵育
一抗孵育：通常4℃过夜孵育（12-16小时），或室温孵育1-2小时；孵育时需保证样本完全被抗体覆盖，可放置于湿盒中防止液体挥发。
二抗结合：选择与一抗种属匹配的二抗，室温避光孵育30-60分钟；洗板/洗片需充分，通常用PBS或TBST清洗3-5次，每次5分钟，去除未结合的二抗。
结果检测
荧光检测：荧光标记抗体需避光操作，封片时使用抗淬灭剂，染色后1小时内完成观察，或4℃避光保存不超过4小时。
显色反应：酶标抗体需严格控制底物孵育时间，避免显色过度或不足；终止反应后及时读取数据，部分显色产物易褪色需尽快分析。
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