磷酸化核因子κB抑制蛋白α抗体
原理特点
该抗体靶向磷酸化IκBα,特异性识别NF-κB通路早期活化修饰,精准检测炎症启动水平;通过结合磷酸化靶蛋白,阻滞其降解,抑制NF-κB核转位与炎症基因表达,有效抑制炎症级联反应。
英文名称:phospho-IKB alpha (Ser32) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化核因子κB抑制蛋白α抗体

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Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:IKB alpha(phospho S32); IKB alpha(phospho Ser32); p-IKB alpha(phospho S32); I kappa B alpha; I-kappa-B-alpha; IkappaBalpha; IkB-alpha; IKBA; IKBA_HUMAN; IKBalpha; MAD 3; MAD3; Major histocompatibility complex enhancer-binding protein MAD3; NF kappa B inhibitor alpha; NF-kappa-B inhibitor alpha; NFKBI; NFKBIA; Nuclear factor of kappa light chain gene enhancer in B cells; Nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B cells inhibitor alpha.
交叉反应:Human,Mouse,Rat
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human IKB alpha around the phosphorylation site of Ser32
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:36 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景:同第一条 p-IκB-α 靶点,IκB-α 磷酸化是 NF-κB 通路激活的限速第一步,磷酸化后快速降解释放转录因子。
抗体原理:经典 IκB-α 降解标记 Ser32/36 双磷酸位点多肽免疫,仅识别待降解活化修饰蛋白。
产品特点:炎症通路最常用初筛指标,多抗形式性价比高,细胞、组织样本广谱适配(与第一条为同靶点常规多抗品类)。
实验操作关键
样本前处理
细胞样本:用PBS缓冲液轻洗2-3次去除培养基残留,固定(如4%多聚甲醛)后按需进行通透处理(0.3% Triton X-100),封闭液(5% BSA或血清)孵育30-60分钟以降低非特异性结合。
组织样本:石蜡切片需先脱蜡水化,根据抗体类型选择合适的抗原修复方法(如柠檬酸盐缓冲液热修复);新鲜组织需尽快固定或冷冻保存。
抗体孵育
一抗孵育:通常4℃过夜孵育(12-16小时),或室温孵育1-2小时;孵育时需保证样本完全被抗体覆盖,可放置于湿盒中防止液体挥发。
二抗结合:选择与一抗种属匹配的二抗,室温避光孵育30-60分钟;洗板/洗片需充分,通常用PBS或TBST清洗3-5次,每次5分钟,去除未结合的二抗。
结果检测
荧光检测:荧光标记抗体需避光操作,封片时使用抗淬灭剂,染色后1小时内完成观察,或4℃避光保存不超过4小时。
显色反应:酶标抗体需严格控制底物孵育时间,避免显色过度或不足;终止反应后及时读取数据,部分显色产物易褪色需尽快分析。
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