磷酸化胰岛素受体底物1 p-IRS-1/2抗体
原理特点
该抗体可广谱识别IRS-1、IRS-2蛋白的磷酸化修饰位点，IRS磷酸化是胰岛素信号通路激活的关键中间步骤，介导糖代谢、胰岛素敏感性、细胞增殖调控。该抗体可同步检测两种底物蛋白的磷酸化水平，整体评估胰岛素通路活化状态；同时可封闭磷酸化功能位点，阻断胰岛素下游信号传导，诱发胰岛素抵抗与糖代谢紊乱，助力研究糖尿病、代谢综合征的发病机制。
英文名称:phospho-IRS1 (Ser307) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化胰岛素受体底物1 p-IRS-1/2抗体
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:IRS1(phospho S307); p-IRS-1; IRS1(phospho-Ser307); IRS1_HUMAN; Insulin receptor substrate 1; IRS-1; IRS 1;
交叉反应:Human
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human IRS1 around the phosphorylation site of Ser307
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量：132 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：IRS1/2 是胰岛素受体下游衔接蛋白，酪氨酸磷酸化激活传导降糖信号；丝氨酸过度磷酸化诱发胰岛素抵抗。
抗体原理：靶向 IRS1/2 激活型酪氨酸磷酸共有位点，同步识别两种活化底物蛋白。
产品特点：糖尿病、肥胖、胰岛素抵抗模型通用，一步评估胰岛素通路整体传导活性。
样本处理与实验操作
1. Western Blot（免疫印迹）
样本制备
细胞样本：PBS洗涤2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂），冰上裂解30分钟，12000rpm离心15分钟取上清，BCA法定量蛋白浓度
组织样本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，离心后取上清，调整蛋白浓度至一致
变性处理：加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟，冷却后上样
抗体孵育
转膜完成后，用5% BSA或牛奶封闭液室温封闭1-2小时
一抗稀释后4℃孵育过夜（12-16小时），或室温孵育1-2小时；孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中
TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟；加入二抗（1:5000-1:10000稀释）室温孵育1-2小时
再次洗涤后，用ECL发光液显影，通过凝胶成像系统采集图像
2. IHC-P（石蜡切片免疫组化）
样本前处理
脱蜡水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分钟），最后用PBS冲洗
抗原修复：将切片放入柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）中，微波炉加热至沸腾，保持10-15分钟，自然冷却至室温
封闭处理：3% H₂O₂室温孵育10分钟灭活内源性过氧化物酶，PBS冲洗后用10%山羊血清封闭30分钟
抗体孵育
一抗稀释后滴加在切片上，4℃孵育过夜；孵育时置于湿盒中，防止液体挥发
次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟；加入二抗（生物素标记）室温孵育30分钟
PBS冲洗后，加入ABC复合物室温孵育30分钟，DAB显色剂显色（显微镜下观察控制时间，通常3-10分钟），苏木素复染后脱水封片
3. ICC/IF（细胞免疫荧光）
样本制备
细胞爬片培养至70-80%汇合度，PBS洗涤2次，4%多聚甲醛固定15-20分钟
通透处理（根据抗体类型选择）：0.1% Triton X-100室温孵育10分钟，PBS冲洗3次
封闭处理：5% BSA室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合
抗体孵育
一抗稀释后滴加在爬片上，4℃孵育过夜，或室温孵育1-2小时
PBS冲洗3次，每次5分钟；加入荧光标记二抗（1:200-1:500稀释），室温避光孵育30-60分钟
再次冲洗后，用抗淬灭封片液封片，荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察采集图像
4. ELISA（酶联免疫吸附试验）
包被与封闭
用包被缓冲液（如碳酸盐缓冲液pH9.6）稀释抗原至合适浓度，每孔加入100μl，4℃包被过夜
弃去包被液，PBST洗涤3次，每次3分钟；加入封闭液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小时
抗体孵育
一抗按比例稀释后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小时，或4℃孵育过夜
PBST洗涤3次，加入稀释好的酶标二抗，每孔100μl，37℃孵育1小时
洗涤后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光显色10-20分钟，加入终止液（2M H₂SO₄），用酶标仪在450nm波长读取OD值
公司正在出售的产品
粘蛋白-1抗体 | 碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗兔IgG H&L | SPOCD1 Antibody Blocking Peptide |
环指蛋白8抗体 | 碱性磷酸酶（AP）标记的驴抗兔IgG H&L | SLC19A1 Antibody Blocking Peptide |
蛋白酪氨酸磷酸酶受体PTPRB抗体 | Cy7标记的小鼠抗兔IgG H&L | AADACL4 Antibody Blocking Peptide |
脑蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶29抗体 | PE-Cy5.5标记的兔抗鸡IgG H&L | TWF2 Antibody Blocking Peptide |
EXOC8蛋白抗体 | PerCP标记的(ab)2片段羊抗小鼠IgG H&L | Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) Antibody Blocking Peptide |
李斯特菌菌体蛋白抗体 | Alexa Fluor 488标记的兔抗豚鼠IgG H&L | GSTA3 Antibody Blocking Peptide |
CD7抗体 | 磷酸化胰岛素受体底物1 p-IRS-1/2抗体PE-CY5标记的羊抗人IgG H&L | LYRM4 Antibody Blocking Peptide |
线粒体核糖核酸酶P蛋白3抗体 | Cy5标记的小鼠抗兔IgM | Recombinant human MUC16 Protein, C-His-Avi (HEK293) |
白介素6抗体 | PE-Cy3标记的小鼠抗兔IgG H&L | CEND1 Antibody Blocking Peptide |
关键字： 磷酸化胰岛素受体底物1 p-IRS-1/;Rabbit;132 kDa;
上海研生实业有限公司成立于2011年专业销售各种科学实验产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、等多个研究及应用领域。旗下有“上研生"品牌。
我们努力将欧美进口品牌的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视国内科研市场的产品开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。
同时国家对于生物行业的发展给予极大的重视，更多地侧重于科研的投入。公司的服务和业务在同行获得认可。也具备丰富的管理经验，同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想，更有责任感，是您科研道路上值得信赖的伙伴。
公司的理念是：以诚信为本，努力打造优质品牌，为您提供产品的售中、售后服务。