本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,针对大鼠ICAM-3建立特异性检测体系。酶标板包被纯化的ICAM-3捕获抗体,样本中的ICAM-3抗原与固相抗体结合后,加入酶标记检测抗体形成夹心复合物。经洗涤、底物显色、终止反应后,吸光度数值与样本中ICAM-3浓度呈正相关,通过标准曲线拟合,可定量测定大鼠样本中ICAM-3的表达水平。
基本参数:

产品名称:大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒
英文名称:ICAM-3 ELISA Kit
货号:Y-E1453
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤2.5pg/mL
检测范围:5pg/mL - 180pg/mL
反应时间:全程125分钟,分步孵育65分钟、40分钟,显色20分钟
保存条件:2-8℃密封冷藏,禁止冷冻,试剂开封后避光保存
有效期:原装有效期10个月,开盖后1个月内用完
特异性:高特异性识别大鼠ICAM-3,与其他粘附分子无明显交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%
注意事项:样本避免反复冻融,防止粘附分子蛋白变性;加样需匀速,避免孔内气泡产生。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂室温静置 21min,配制 ICAM-3 标准品系列浓度,待测样本稀释后加样,空白孔添加稀释液,每孔 50μL。
加入酶标记工作液 50μL,封板避光孵育,37℃恒温 63min。
洗板 4 次,每次洗液浸润 29s,倒扣拍干微孔。
显色 A 液、B 液各 50μL 依次添加,混匀后显色 16min。
加入终止液 50μL 终止酶促反应。
酶标仪 450nm 读取各孔吸光度。
绘制标准曲线,换算稀释比例计算 ICAM-3 含量。
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