细胞简介
人Burkitt's淋巴瘤细胞Raji细胞由R.J.V.Pulvertaft于1963年从一名11岁黑人男性的左上颌骨的Burkitt's淋巴瘤中分离建系,是第一个人类造血系统的连续传代细胞。Raji细胞表达B细胞抗原(CD19、CD20等),广泛应用于免疫学研究、癌症研究和抗癌药物开发。该细胞是非贴壁细胞,以单细胞或聚团的形式悬浮生长,可作转染宿主,细胞中含有EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)DNA序列。
运输和保存
1.1 mL冻存管包装干冰运输,收货后-80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。若发现干冰已经挥发干净、冻存管盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.T25瓶培养的细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
培养瓶细胞接收后的处理
1.收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2培养箱中静置3-4 h,以稳定细胞状态。若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2.请在显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照,10倍和20倍各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后依据。
3.细胞收货脱落:若细胞在快递运输途中因振动脱落,先将培养瓶放入37℃,5%CO2培养箱中静置3-6 h,让少数脱落的细胞可再附着生长。若仍有脱落聚集的细胞,则 (1) 收集所有细胞悬液,1000 rpm离心5 min,保留沉淀;(2) 添加胰蛋白酶消化液0.5 mL至离心管中,重悬沉淀,置于37℃消化1-2 min左右;(3) 向离心管内加入5 mL完全培养基终止消化;(4) 1000 rpm,离心5 min,丢弃上清,用5 mL完全培养基(补加1-5% FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;(5) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
4.收货细胞的培养和传代:在显微镜下观察细胞生长状态,若细胞生长密度在60%以下,可去除培养瓶中的灌液培养基,加入新配制的完全培养基,置于培养箱中继续培养。若细胞生长密度达80%-90%以上,可以对细胞进行传代处理。
5.运输用的培养基(灌液培养)不能再用来培养细胞,请换用合适的新鲜培养基来培养细胞。
冻存细胞接收后的处理
收货后-80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。
细胞复苏:将含有1 mL细胞悬液的冻存管置于37℃水浴中迅速摇晃解冻,回温后喷以75 %酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。将冻存管中细胞加入到含4-6 mL完全培养基的离心管中混合均匀。1000 rpm离心3-5 min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入T25培养瓶/6 cm培养皿中,培养箱中孵育。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
培养信息
细胞名称 | Raji,人Burkitt's淋巴瘤细胞 |
别称 | RAJI; P1-Raji; GM04671 |
种属来源 | Homo sapiens, human,黑人,男性 |
组织来源 | 左上颌骨的Burkitt's淋巴瘤 |
细胞类型 | B淋巴细胞 |
疾病 | Burkitt's淋巴瘤 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 Raji细胞通常在悬浮中以不同大小的浮动簇生长。随着培养密度的增加,细胞簇可以变得非常大,尽管也可能存在一些单细胞。在这个细胞系中,碎片是正常的。 |
传代比例 | 1:3-1:5,每2-3天传代; ● 该细胞为悬浮细胞。可通过补充新鲜培养基或者离心换液两种方式维持培养。根据培养经验,建议传代时使用“半换液法”对细胞状态有利,即直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液,然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可(1:2传代)。 ● 刚复苏后,细胞会出现黑色细胞碎片,少量细胞碎片不影响细胞正常生长。 ● 细胞浓度不应超过2-3×106 cells/mL,应加入足够的培养基使细胞浓度降至3-5×105 cells/mL,并避免生长培养基过度酸化。 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长培养基 | 10% FBS、RPMI 1640、1% Penicillin-Streptomycin |
培养条件 | 气相:95% 空气、5% CO2;温度:37℃ |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO;液氮 |
生物安全等级 | BSL-2 |
支原体检测 | 阴性 |
STR鉴定结果 | D3S1358: 15,16 TH01: 6,7 D21S11: 28,31 D18S51: 17 Penta_E: 5,13 D5S818: 10,13 D13S317: 13 D7S820: 10 D16S539: 8,11 CSF1PO: 10,12 Penta_D: 3.2,9 Amelogenin: X,Y vWA: 16,19 D8S1179: 14,15 TPOX: 8,13 FGA: 19,27 D19S433: 14,14.2 D2S1338: 22 |
注意事项 | 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液,请勿直接倒掉细胞培养液。 |
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