Recombinant Human PF4
PF4传统上被认为是血小板α颗粒释放的产物，能够中和肝素的抗凝作用并趋化中性粒细胞27。然而，最新的突破性研究揭示了其作为“抗衰老因子”的全新角色：随着年龄增长，体内PF4水平下降，导致造血干细胞（HSC）功能衰退；外源性补充重组PF4蛋白可逆转老年小鼠及人类造血干细胞的衰老表型，恢复免疫平衡38。此外，PF4还能通过外周作用改善衰老小鼠的认知能力9。重组PF4蛋白是探索血液系统衰老机制、神经免疫调节及开发相关治疗策略的核心工具。
商品介绍：
A-01K100205-50μg | Recombinant Human PF4 |
A-01K100205-200ug | Recombinant Human PF4 |
A-01K100205-1mg | Recombinant Human PF4 |
别称：C-X-C motif chemokine 4, Chemokine (C X C motif) ligand 4, Chemokine (CXC motif) ligand 4, chemokine ligand 4, CXCL 4, CXCL4, Iroplact, MGC138298, Oncostatin A, Oncostatin-A, OncostatinA, PF 4, PF-4, PF4, Pf4a, Platelet factor 4, PLF4_HUMAN, SCYB 4, SCYB4, short form, Small inducible cytokine subfamily B, Small inducible cytokine subfamily member 4
标签：N-terminal His Tag
种属：Human
宿主：E.Coli
表达区间：31-101
分子量：7.7 kDa
Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用：Western Blot, ELISA
性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度：Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
检测原理详解：
包被抗体结合
实验开始前，微孔板已预先包被?抗人白脂素单克隆抗体。当加入待测样本后，样本中的人白脂素（Asprosin）
会与固相载体上的捕获抗体特异性结合。
形成“夹心复合物”
洗涤去除未结合物质后，加入?生物素标记的检测抗体，该抗体与白脂素分子的另一表位结合，形成“固相抗体
—抗原—检测抗体”三明治结构。
酶促显色反应
随后加入?辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素检测抗体结合。最后加入TMB显色底物，在
HRP催化下产生蓝色产物，反应终止后变为黄色。
浓度定量分析
黄色深浅与样本中白脂素含量成正比，通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度（OD值），并根据标准曲线计
算出样本中白脂素的浓度。
公司正在出售的产品：
肽基脯氨酸异构酶酶FKBP25 | 通用型甘油三酯（triglyceride）含量酶连续循环反应比色法 |
FITC标记小鼠CD23单克隆 | 细胞αSMA蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
豆类纤维素酶解法定量pcr检测试剂盒 | 载玻片细胞MAPK蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
重组腺病毒效价比色法定量pcr检测试剂盒 | 体液牛病毒性腹泻病毒II型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -2；BVDV-2）定量PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
组织PTEN活性定磷比色法定量pcr检测试剂盒 | 慢性淋巴细胞白血病缺失基因6蛋白抗体 |
植物脂质比色法定量pcr检测试剂盒 | 短粗矮胖19蛋白样1抗体 |
组蛋白H2A-T129磷酸化pcr检测试剂盒 | 细胞甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）染色试剂盒 |
谷胱甘肽S转移酶κ | 细胞腺苷酸环化酶（Adenylate Cyclase）活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
周期素H | 羊抗人纤维蛋白原抗体 |
PerCP-Cy5.5标记的转录因子SOX9蛋白 | 9号染色体开放阅读框150抗体 |
肌肉特异性蛋白MYOZ2 | Recombinant Human PF4«磷酸化过氧化酶活化增生受体γ抗体 |
RALYL蛋白 | 细胞乙酰酯酶活性荧光法定量检测试剂盒 |
Recombinant Human CDKA1 | Recombinant Human Mob1A |
实验步骤：
1. 基因克隆与表达载体构建
从人类FBN1基因C端序列中扩增?Asprosin编码片段（约140aa）。
将目的片段插入原核表达载体，确保带有?N端或C端His标签，便于后续纯化。
转化至?感受态细胞，筛选阳性克隆并测序验证。
2. 重组蛋白诱导表达
取阳性菌落接种于LB培养基（含氨苄青霉素），37℃振荡培养过夜。
次日按1:100比例转接至新鲜LB培养基，37℃培养至OD600达0.6–0.8。
加入?IPTG至终浓度0.1–1.0 mM?，?16–25℃诱导表达6–12小时（低温诱导有助于可溶性表达）。
4℃、8000×g离心10分钟收集菌体，弃上清，-20℃保存备用。
3. 菌体裂解与蛋白提取
将菌体沉淀重悬于?裂解缓冲液（如PBS + 1% Triton X-100 + 蛋白酶抑制剂），超声破碎（冰浴条件下，每次30秒，共6–10次，功率30%）。
4℃、12000×g离心20分钟，收集上清（可溶性蛋白）或沉淀（包涵体蛋白）。
若为包涵体蛋白，需用?洗涤缓冲液（含2M尿素的PBS）洗涤2–3次，去除杂蛋白。
4. 亲和层析纯化（Ni-NTA法）
将含His标签的蛋白溶液（或溶解后的包涵体蛋白，使用含6–8M尿素的缓冲液溶解）上样至?Ni-NTA亲和层析柱。
用?洗涤缓冲液（含20–40mM咪唑）洗去非特异性结合蛋白。
用?洗脱缓冲液（含250–500mM咪唑）梯度洗脱目标蛋白，收集洗脱峰。
透析去除尿素与咪唑（使用PBS或生理缓冲液，4℃过夜，更换3次）。
5. 蛋白复性（针对包涵体蛋白）
若蛋白以包涵体形式表达，需在纯化后进行?梯度复性：
将变性蛋白缓慢加入含?梯度降低尿素?（6M → 4M → 2M → 0M）的复性缓冲液中，4℃搅拌过夜。
或采用?透析法?逐步去除变性剂。
复性后再次离心取上清，检测蛋白活性。
关键字： PF4;Human;E.Coli;
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