基本信息
中文名称:PM原代细胞质粒DNA转染试剂盒
货号:P-PR1416
规格:0.5ml、1.0ml、1.5ml
英文名称:PM Primary Cell Plasmid DNA Transfection Kit
作用机制:借助专用的转染试剂,将质粒DNA包裹形成具有生物相容性的复合物,促进原代细胞对质粒DNA的摄取,实现目的基因在原代细胞中的表达,配方经过优化以适配原代细胞的脆弱特性。
适用样本:多种组织来源的原代细胞。
产品概述
本试剂盒专为原代细胞的质粒DNA转染设计,采用生物可降解材料制备,兼具高转染效率与低细胞毒性优势。无需更换培养基,可直接在含血清体系中操作,适配绝大多数原代细胞类型,质粒DNA转染效率最高可达85%以上,转染后细胞死亡率低于10%。
组成成分
组分 规格(示例) 说明
转染试剂 0.5mL 核心转染成分
缓冲液 5mL 用于稀释质粒DNA
说明书 1份 含详细操作步骤与注意事项
操作步骤
细胞准备
转染前24小时,将原代细胞接种于培养板,确保转染时汇合度达到50%-70%
细胞培养基可使用常规含血清培养基,无需提前更换无血清培养基
复合物制备
取1μg质粒DNA,加入50μL缓冲液中,轻柔混匀
取2.5μL转染试剂,加入另一管50μL缓冲液中,轻柔混匀
将稀释后的转染试剂逐滴加入DNA稀释液中,轻轻涡旋混匀,室温静置15-20分钟,形成转染复合物
转染操作
将制备好的100μL转染复合物均匀滴加至含1mL培养基的细胞孔中
轻轻摇晃培养板,使复合物均匀分布
将细胞放回培养箱,常规培养24-48小时后检测转染结果
结果检测
若转染的是带荧光标记的质粒,可直接通过荧光显微镜或流式细胞仪观察转染效率
若转染的是目的基因,可通过qPCR、Western Blot等方法检测基因表达水平
注意事项
质粒DNA需保证纯度,OD260/280比值应在1.8-2.0之间
转染试剂避免反复冻融,建议分装后-20℃保存
不同原代细胞类型的转染效率可能存在差异,可根据实际情况调整DNA与转染试剂的比例
操作过程中避免产生气泡,以免影响转染复合物的形成
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关键字: PM原代细胞质粒DNA转染试剂盒;PM Primary Cell Plas;
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