基本信息
中文名称：PolyA聚合酶
货号：P-PR1430
规格：200U 5u/ul、400U 5u/ul
英文名称：Poly(A) Polymerase
作用机制：能够在RNA分子的3'末端催化添加多聚腺苷酸（PolyA）尾巴，模拟天然mRNA的结构，可增强RNA的稳定性、提升mRNA在体外翻译系统中的效率，或用于构建cDNA文库。
适用样本：体外转录的RNA、天然RNA分子等。
产品概述
PolyA聚合酶是从重组菌株E.coli中分离得到的酶类，能够以单链RNA为模板、ATP为底物，在RNA的3′末端依次添加AMP，形成20~200个碱基长度的多聚A尾。该酶对RNA的3′末端加尾具有较高选择性，加尾长度可通过酶量、ATP浓度和反应时间灵活调控。
产品用途
增强mRNA稳定性：为mRNA添加PolyA尾，保护其免受核酸外切酶降解，延长半衰期
辅助cDNA合成：为microRNA等短链RNA添加PolyA尾，提供oligo-dT引物结合位点
提高RNA表达效率：增强转染或显微注射后RNA在细胞内的翻译效率
分子标记与纯化：用于RNA末端标记、克隆或亲和纯化等实验
组分规格（以100U规格为例）
组分名称 规格
Poly(A)聚合酶(5U/μL) 20μL
10×Poly(A)聚合酶缓冲液 1mL
10mM ATP溶液 100μL
25mM MnCl₂溶液 500μL
活性定义
在37℃、pH7.9条件下，10分钟内将1nmol AMP掺入到RNA分子所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
标准反应体系（20μL）
试剂名称 体积
10×Poly(A)聚合酶缓冲液 2μL
Poly(A)聚合酶(5U/μL) 0.2~1μL
10mM ATP溶液 2μL
25mM MnCl₂溶液 2μL
RNA模板 0.5~10μg
RNase-Free水 补至20μL
⏱️ 反应条件与加尾长度调控
反应时间 预计加尾长度
30分钟 ~30个A碱基
1小时 ~100个A碱基
2小时 ~200个A碱基
注：相同RNA量和反应时间下，酶量增加会使加尾长度相应增大
终止与纯化方法
终止反应：添加EDTA至终浓度10mM，或65℃加热20分钟
RNA纯化：
酚/氯仿抽提法：产物稀释后加入等体积酚/氯仿混合液，离心取水相，加2倍体积无水乙醇沉淀RNA
柱纯化法：产物稀释后按照RNA纯化柱说明书进行操作
注意事项
本产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途
EDTA会抑制酶活性，反应体系中应避免引入EDTA
所有操作需使用RNase-Free耗材及试剂，防止RNA降解
酶活性受温度影响较大，建议在冰上进行试剂配制
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关键字： PolyA聚合酶;Poly(A) Polymerase;
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