基本信息
中文名称：粪便DNA提取试剂盒
货号：P-PR1483
规格：50T、100T
英文名称：Fecal DNA Extraction Kit
作用机制：强效裂解液破碎粪便中的细胞和微生物，去除粪便中的抑制物（如腐殖酸、胆汁酸等），通过吸附柱或磁珠结合DNA，纯化得到可用于后续实验的粪便DNA。
适用样本：人类或动物粪便样本。
产品概述
本试剂盒专为从各类粪便样本中高效提取基因组DNA设计，采用优化的裂解体系与核酸吸附技术，可有效去除粪便中的腐殖酸、色素、蛋白等抑制因子，获得的DNA纯度高、片段完整，可直接用于PCR、荧光定量PCR、测序等下游分子生物学实验。
试剂盒组成（50次反应规格）
组分 规格
裂解液Ⅰ 35mL
裂解液Ⅱ 35mL
结合缓冲液 35mL
漂洗液Ⅰ 30mL
漂洗液Ⅱ 25mL
洗脱缓冲液 15mL
TE缓冲液 60mL
高效蛋白酶 1.4mL×2
溶菌酶 500mg
DNA吸附柱（含收集管） 50套适用样本
新鲜或冷冻保存的人、牛、鸡、小鼠等多种动物粪便样本，支持固态、液态等不同形态样本处理。
实验前准备
试剂配制：
溶菌酶溶液：将500mg溶菌酶溶于5mL TE缓冲液，配制成100mg/mL的溶液，分装后-20℃保存，使用前室温溶解。
漂洗液Ⅱ：使用前按照瓶身标注体积加入无水乙醇，充分混匀后室温保存。
仪器准备：恒温水浴锅/金属浴、高速离心机（≥12000rpm）、移液器、离心管等。
实验操作步骤
样本预处理
固态样本：称取50-200mg粪便样本置于2mL离心管中；
液态样本：取200μL样本于2mL离心管中，13300rpm（约17000×g）离心1min，弃上清留沉淀。
样本裂解
向样本中加入1mL TE缓冲液、100μL溶菌酶溶液，充分混匀后37℃摇床温浴10min（转速180rpm）；
13300rpm离心1min，吸除上清（尽量吸净，避免影响后续操作）；
加入600μL裂解液Ⅰ、50μL高效蛋白酶，上下颠倒剧烈混匀；
65℃水浴/金属浴孵育5min，期间颠倒混匀1次（确保样本无结块）。
杂质去除
13300rpm离心1min，将上清转移至新的2mL离心管（避免吸入沉淀）；
加入等体积裂解液Ⅱ，上下颠倒充分混匀，室温静置2min；
13300rpm离心1min，取600μL上清转移至新的2mL离心管。
DNA结合与纯化
加入600μL结合缓冲液，上下颠倒混匀，65℃水浴孵育5min，期间颠倒混匀1次；
加入240μL无水乙醇（96%-100%），涡旋混匀10sec，瞬时离心收集管壁液滴；
将混合液分两次加入DNA吸附柱，每次加入后12000rpm离心1min，弃收集管废液；
向吸附柱中加入500μL漂洗液Ⅰ，12000rpm离心1min，弃废液；
向吸附柱中加入700μL漂洗液Ⅱ，12000rpm离心1min，弃废液，重复此步骤1次；
将吸附柱放回收集管，12000rpm空管离心2min，彻底去除残留漂洗液。
DNA洗脱
将吸附柱转移至新的1.5mL离心管中，加入50-200μL洗脱缓冲液，室温静置2min；
12000rpm离心2min，收集离心管中的液体即为提取的基因组DNA，可立即用于下游实验或-20℃保存。
注意事项
实验过程中请佩戴手套、口罩，避免试剂直接接触皮肤和黏膜；如不慎沾染，立即用大量清水冲洗，必要时就医。
不同样本的DNA含量存在差异，可根据实际情况调整样本量与洗脱液体积。
试剂盒所有组分请按照规定条件保存，避免反复冻融；试剂出现浑浊、沉淀时，可37℃水浴溶解后使用。
实验所用离心管、移液器吸头需保证无核酸酶污染，建议使用无菌无酶耗材。
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