基本信息
产品名称 | Strep tagII Benzonase核酸酶(科研级) | 货号 | P-PR1369 |
规格 | 25KU、100KU、5000ku | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:Strep tagII Benzonase Nuclease (Research Grade)
作用机制:一种带有Strep tagII标签的核酸酶,可非特异性降解所有类型的核酸(DNA和RNA),产生3'端带羟基、5'端带磷酸基团的核苷酸片段,标签便于酶的纯化和固定化,适用于科研实验中去除核酸污染。
适用样本:蛋白样本、细胞提取物、抗体溶液等需要去除核酸污染的样本,可用于蛋白纯化、蛋白结构分析、酶活性测定等实验。
产品概述
这是一种带有Strep tagII标签的科研级Benzonase核酸酶,能在广泛的条件下降解所有形式的DNA和RNA(包括单链、双链、线性和环状),产生3'-单核苷酸或二核苷酸。Strep tagII标签的引入便于该酶的纯化和检测,科研级的品质确保了其高活性和低杂质特性,可用于去除细胞裂解液中的核酸杂质、降低样品黏度、蛋白质纯化过程中去除核酸污染等实验,为获得高纯度的蛋白质样品提供保障。
产品特点
全能核酸降解:可高效降解所有形式(单链/双链、线性/环状)的DNA和RNA
标签纯化便利:融合Strep-tagII标签,可通过StrepTactin XT Resin快速去除酶本身
低残留优势:一步纯化可去除98%的核酸酶污染,满足蛋白样品高纯度要求
合规性保障:降解产物为3-5碱基的5'-单磷酸寡核苷酸,符合FDA核酸污染处理标准
操作步骤
一、试剂预处理
取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液,按试剂瓶标注比例加入无水乙醇,充分混匀后备用
将洗脱液置于65℃水浴锅中预热
二、水样处理与核酸富集
取10mL预处理后的水样(杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤)加入50mL洁净烧杯
依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液,充分搅拌混匀
将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟,期间每隔5分钟搅拌一次
三、核酸纯化与洗脱
向烧杯中加入15mL异丙醇,充分搅拌混匀后,将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内
静置2分钟后,开启真空抽滤装置,将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内(注意不要抽干)
向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ,静置2分钟后抽滤;再加入5mL洗涤液Ⅱ,静置2分钟后抽滤,重复洗涤液Ⅱ步骤1次
取下富集吸附柱,放入收集管中,12000rpm常温离心3分钟,去除残留洗涤液
将吸附柱转移至新的收集管,加入50-100μL预热的洗脱液,静置2分钟后12000rpm离心2分钟
收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸,可直接用于下游实验或-70℃保存
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注意事项
试剂保存:试剂盒应避光保存于2-8℃,有效期12个月;核酸富集因子避免反复冻融,使用后立即放回冰箱
水样预处理:高浊度或杂质过多的水样,需先经0.45μm滤膜过滤,避免堵塞吸附柱
操作规范:实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品,避免直接接触水样与试剂;若不慎接触皮肤或眼睛,立即用大量清水冲洗
试剂配制:洗涤液需现用现配,按比例加入无水乙醇后充分混匀,未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月
核酸保存:提取的核酸若长期保存,需置于-70℃环境,避免反复冻融;短期可在4℃保存24小时
器材要求:所有实验器材需为无RNA酶耗材,实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理
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