基本信息
产品名称 | UNG (Uracil N-Glycosylase) | 货号 | P-PR1353 |
规格 | 1000U、5000U | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Uracil-DNA Glycosylase (UNG)
作用机制：一种尿嘧啶-DNA糖基化酶，可特异性识别并切除DNA链中的尿嘧啶碱基，产生AP位点，随后可在其他酶的作用下修复DNA，常用于PCR反应中，降解含有尿嘧啶的扩增产物，避免交叉污染。
适用样本：含有尿嘧啶的DNA样本，如使用dUTP的PCR扩增产物，可用于PCR反应的防污染处理，以及DNA损伤修复机制研究。
产品概述
这是一种尿嘧啶-N-糖苷酶，能够特异性识别并切除DNA中的尿嘧啶碱基，形成AP位点，随后在AP内切酶等其他酶的作用下完成DNA修复。它主要用于防止PCR反应中的污染，通过去除含有尿嘧啶的DNA模板，避免假阳性结果的产生，在PCR、qPCR等核酸扩增实验中，是保证实验准确性和可靠性的重要工具酶。
产品特点
尿嘧啶特异性：识别并切除DNA中的尿嘧啶碱基，形成AP位点
防污染机制：降解含尿嘧啶的PCR产物，避免交叉污染导致的假阳性
温度特性：37℃发挥活性，95℃处理10分钟完全失活
兼容性广：适用于各种PCR和qPCR体系，与UDG酶功能类似
操作步骤
一、样本准备
取1-5mL漱口水样本转移至15mL离心管中，12000rpm离心10分钟，弃上清，收集细胞沉淀。
二、细胞裂解
向离心管中加入200~400μL细胞裂解液，再加入15~20μL蛋白酶K溶液
涡旋震荡10秒充分混匀，将离心管放入75℃恒温震荡器中，900rpm恒温震荡裂解45分钟
裂解完成后短暂离心，将上清液转移至新的离心管中
三、DNA吸附
向裂解上清中加入等体积的结合缓冲液，轻轻颠倒混匀
将混合液全部转移至一次性吸附柱中，12000rpm离心30秒，弃收集管中的废液
向吸附柱中加入500μL漂洗液，12000rpm离心30秒，弃废液；重复此漂洗步骤1次
四、DNA洗脱
将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2分钟，彻底去除残留漂洗液
将吸附柱转移至新的1.5mL离心管中，向吸附柱中心加入50~100μL洗脱缓冲液（可预热至65℃提升洗脱效率）
室温静置2分钟，12000rpm离心1分钟，离心管中的液体即为提取完成的基因组DNA
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使用建议
溶解与保存：建议以液体形式保存于-20℃，避免反复冻融。
反应条件：常规反应温度为37℃，灭活需50℃处理5分钟。
推荐用量：根据实验体系优化，通常每50μL反应体系添加0.1-1U。
关键字： UNG (Uracil N-Glycos;
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